Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
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Prenez une plaque multipuits contenant des organoïdes cérébraux humains dans un milieu d’induction neuronale.
Les organoïdes contiennent des cellules souches, des cellules gliales radiales, des cellules progénitrices neurales ou NPC et des neurones disposés selon un motif radial appelé rosette, imitant le cerveau en développement.
Retirez le milieu et lavez les organoïdes avec un tampon.
Ajoutez le virus Zika en suspension dans une mémoire tampon aux puits de test et uniquement la mémoire tampon aux puits de contrôle.
Incuber, permettant au virus de se lier à ses récepteurs sur les NPC et de s’internaliser.
Lavez pour éliminer les virus non internalisés, puis ajoutez un nouveau milieu d’induction neurale et incuberez.
Les virus internalisés utilisent la machinerie de la cellule hôte pour former de nouvelles particules virales.
La multiplication virale déclenche une réponse de stress cellulaire qui induit l’apoptose, réduisant ainsi le nombre de NPC disponibles pour le développement d’organoïdes.
Au fil du temps, les organoïdes infectés présentent une taille réduite et une morphologie perturbée, reflétant un développement cérébral anormal chez les humains infectés par le virus Zika.
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