Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:20 min • July 8th, 2025
Placez les cerveaux de drosophile de type sauvage et mutants dans une solution contenant un fixateur et un détergent. Incuber avec un léger balancement.
Le fixateur préserve la morphologie des tissus, tandis que le détergent perméabilise les membranes cellulaires.
Laissez le cerveau se déposer, puis retirez la solution.
Lavez les mouchoirs avec un tampon.
Ajoutez une solution bloquante pour empêcher la liaison d’anticorps non spécifiques.
Retirez la solution et ajoutez-y des anticorps primaires ciblant une protéine spécifique qui régule le développement axonal dans les neurones du corps champignon du cerveau.
Incuber pour favoriser la liaison des anticorps.
Laver avec un tampon pour éliminer les anticorps non liés.
Incuber avec des anticorps secondaires conjugués aux fluorophores ciblant les anticorps primaires.
Lavez à nouveau pour éliminer les anticorps non liés, puis remettez les cerveaux en suspension dans un milieu de montage.
Montez les cerveaux sur une lame de pont et visualisez-les au microscope à fluorescence.
Par rapport au type sauvage, les cerveaux mutants présentent un phénotype défectueux, avec des erreurs de projections axonales et des lobes MB manquants.
Au microsco
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques