Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:55 min • July 8th, 2025
Prenez des cellules souches embryonnaires humaines, ou CSEh, dans un flacon recouvert d’une matrice extracellulaire.
Remplacez le milieu par un milieu d’induction neurale et incubez, en différenciant les CSEh en colonies de cellules progénitrices neurales, ou NPC.
Ajouter une solution enzymatique pour dissocier les colonies.
Centrifugez, éliminez le surnageant et remettez les cellules en suspension dans un milieu d’induction avec des facteurs de croissance pour soutenir la différenciation des NPC.
Ajoutez la suspension cellulaire sur des micropuits de forme pyramidale inversée pour former des neurosphères tridimensionnelles.
Transférez les neurosphères dans une plaque recouverte d’une matrice extracellulaire contenant un milieu de différenciation avec des facteurs de croissance et de petites molécules. Incuber sous agitation pour favoriser la différenciation en neurones progéniteurs dopaminergiques.
Remplacer le milieu par un milieu de maturation neurale et placer les neurosphères sur un disque membranaire dans un insert de puits de culture, permettant la diffusion de l’air et des nutriments.
Incuber dans des conditions statiques pour former des organoïdes tridimensionnels constitu
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