Génération d’un modèle murin de lésion cérébrale traumatique à l’aide d’une sonde d’impacteur

Commencez par une souris immobilisée et anesthésiée avec le crâne rasé.

Appliquez une pommade pour les yeux et désinfectez le cuir chevelu avec de l’iode.

Retirez l’excès d’iode et couvrez la souris avec un champ chirurgical.

Faites une incision médiane pour exposer le crâne et nettoyer la plaie.

Marquez un cercle sur un côté du crâne, en ciblant le cortex cérébral.

Le cortex contient des neurones moteurs et sensoriels essentiels à la transmission du signal entre le cerveau et le corps.

Percez l’os du crâne sur le marquage de manière circulaire, puis retirez le rabat osseux pour exposer le cortex.

Placez une sonde d’impact stérilisée sur la zone exposée. Frappez la sonde sur le tissu pour fournir une pression élevée.

Cette pression induit des traumatismes dans le cortex cérébral, perturbant les neurones moteurs et sensoriels et altérant la transmission du signal.

Nettoyez la plaie et suturez-la. Le modèle murin avec une lésion cérébrale traumatique est prêt pour d’autres expériences.

Pour effectuer une craniectomie unilatérale, confirmez une absence de réponse au pincement des orteils chez la souris anesthésiée et fixez la souris dans un cadre stéréotaxique. Appliquez une pommade ophtalmique antibiotique sur les yeux à l’aide d’un coton-tige stérile et une solution à base d’iode sur la zone du cuir chevelu rasé. Retirez l’iode avec de l’éthanol à 70 % et couvrez l’animal d’un champ chirurgical fenêtré.

Faites une incision de 1,5 à 2 centimètres sur la ligne médiane du cuir chevelu et utilisez des cotons-tiges stériles pour nettoyer la plaie et dégager le fascia gauche de la ligne médiane au niveau de la bregma. Utilisez une sonde à percussion pour identifier le site de craniectomie et réglez le point de référence stéréotaxique x est égal à 0, y est égal à 0 sur bregma. Ajustez la sonde latéralement à deux millimètres à gauche de la ligne médiane. À l’aide d’un marqueur à pointe fine et sans danger pour la chirurgie, tracez un cercle de cinq millimètres de diamètre autour de la zone d’impact présumée.

Soulevez et tournez l’élément de frappe hors de sa position et complétez le cercle de 5 millimètres. Remettez brièvement l’élément de frappe en position pour vérifier la précision du cercle de 5 millimètres. Ensuite, soulevez et tournez l’impacteur hors de sa position, et utilisez un outil à main à grande vitesse équipé d’une pointe ronde de foret à oiseau de 0,6 ou 0,8 millimètre pour faire un trou ouvert dans le crâne à une vitesse maximale de 70 % à 80 %. Appliquez une légère pression sur le crâne tout en perçant le long du contour circonférentiel de 5 millimètres pour amincir cette bordure, et utilisez une pince pour soulever le rabat osseux résultant.

Le forage à travers les lignes de suture peut présenter des difficultés supplémentaires car l’os est interrompu et nécessite une pression supplémentaire. Les vaisseaux sanguins peuvent être en étroite association et, par conséquent, des événements hémorragiques sont probables.

Pour induire une légère lésion d’impact cortical contrôlée, nettoyez la sonde de l’impacteur avec un tampon de préparation à l’alcool stérile et remettez la sonde de l’impacteur en position sur le cortex exposé. Abaissez la sonde jusqu’à ce qu’elle touche la surface de la dure-mère et marquez cette position comme z est égal à 0. Retirez le piston, et déplacez-vous à z égale moins 1 millimètre, et déchargez le piston pour frapper le cortex. Soulevez immédiatement le piston et déplacez le bras hors de sa position, et irriguez le cortex avec un volume généreux de solution saline, et utilisez de simples points interrompus et une suture en soie 5-0 pour fermer l’incision du cuir chevelu.