Évaluation in vitro de l’β amyloïde agrégée sur l’effondrement du cône de croissance neuronale

Commencez par une lame de culture multi-puits contenant des neurones d’un embryon de souris dans un milieu.

Les neurones présentent des cônes de croissance à l’extrémité de leurs axones en croissance. Ces structures comprennent de minces projections appelées filopodes et des extensions en forme de feuille appelées lamellopodes, qui sont constituées de filaments d’actine et de microtubules, composants du cytosquelette.

Traitez les puits d’essai avec de la protéine agrégée de β-amyloïde, ou Aβ, et les puits de contrôle avec une solution de véhicule.

Dans les puits d’essai, l’agrégat Aβ se lie aux récepteurs membranaires, initiant une signalisation en aval qui phosphoryle les protéines régulatrices du cytosquelette.

Les protéines phosphorylées perturbent les filaments d’actine et les microtubules, déstabilisant l’intégrité structurelle du cône de croissance et provoquant son effondrement.

Incuber avec un fixateur pour préserver la structure cellulaire, puis laver les cellules et les monter pour l’imagerie.

À l’aide d’un microscope, comparez les structures cellulaires dans les puits d’essai et de contrôle.

Une augmentation de l’occurrence de l’effondrement des cônes de croissance dans