Détection de microhémorragies cérébrales dans un modèle de rat

Les microhémorragies cérébrales, ou CMH, sont des hémorragies cérébrales neuroinflammatoires causées par la rupture de la barrière hémato-encéphalique, entraînant la fuite de globules rouges, ou GR, dans le tissu cérébral.

Pour détecter les CMH, commencez par utiliser du tissu cérébral fixe d’un rat atteint de CMH.

Immergez le tissu dans du saccharose pour la cryoprotection.

À l’aide d’un cryomicrotome, sectionnez le tissu et prélevez une section sur une lame de verre.

Laver pour éliminer les résidus de fixateur.

Appliquez un colorant à l’hématoxyline lié à un cation métallique qui interagit avec l’ADN chargé négativement, colorant le noyau en violet rougeâtre.

Poursuivez avec de l’alcool acide pour éliminer l’excès de colorant, puis appliquez un agent bleuissant alcalin pour neutraliser l’environnement acide et convertir le colorant en sa forme bleue, améliorant ainsi le contraste.

Lavez le mouchoir avec de l’alcool pour améliorer la pénétration de la tache, puis appliquez de l’éosine pour colorer les globules rouges en rouge-orange et les composants tissulaires en rose.

Déshydratez le tissu à l’aide de concentrations croissantes d’alcool et éclaircissez-le avec du xylène pour une