Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:33 min • July 8th, 2025
Commencez par une plaque sans fond à plusieurs puits fixée à une membrane en silicone. La membrane est recouverte d’un biopolymère pour faciliter l’adhésion cellulaire.
Introduire dans les puits des neurones dérivés de cellules souches pluripotentes induites humaines, ou hiPSCN, en suspension dans un milieu. Le milieu est complété par des protéines de matrice extracellulaire, ou ECM, pour améliorer l’adhésion cellulaire.
Incuber la plaque, permettant aux cellules d’adhérer aux protéines ECM et au biopolymère, favorisant une interaction uniforme avec la surface de la membrane.
Ensuite, fixez la plaque sur la scène d’un dispositif de blessure.
À l’aide de l’appareil, appliquez une indentation sur la membrane pour générer une contrainte mécanique contrôlée sur les neurones.
Le stress perturbe le cytosquelette, ce qui provoque la dégénérescence des protubérances cellulaires appelées neurites et la formation de petits gonflements le long des neurites.
Le stress endommage également l’intégrité de la membrane cellulaire, entraînant la mort cellulaire.
Les hiPSCN présentant un phénotype de lésion par étirement sont maintenant prêts pour l’analyse.
Pour étirer la plaque, remplacez les champ
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