JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurosciences
0 vues • 2:26 min • July 8th, 2025
Commencez par une solution de résinifératoxine (RTX), un agoniste de haute affinité du récepteur TRPV1, des canaux ioniques sensibles à la douleur exprimés sur les neurones sensoriels.
Prenez une souris adulte anesthésiée et administrez-lui du RTX par voie intrapéritonéale.
Le médicament entre dans la circulation systémique et atteint les ganglions de la racine dorsale (DRG), un groupe de corps cellulaires neuronaux sensoriels situés près de la moelle épinière.
Le RTX traverse la barrière hémato-nerveuse et interagit avec les neurones sensoriels de petit diamètre dans le DRG qui expriment abondamment le TRPV1.
La liaison de RTX à TRPV1 active les récepteurs, induisant un afflux massif d’ions calcium dans les neurones.
Le calcium intracellulaire active des enzymes qui dégradent les phospholipides de la membrane cellulaire, les protéines cellulaires et l’ADN, conduisant finalement à la mort neuronale.
Par la suite, les fibres nerveuses intraépidermiques (IENF), les terminaisons périphériques des neurones sensoriels de petit diamètre qui innervent la peau, commencent à dégénérer.
Cette dégénérescence des IENF entraîne la perte d’informations sensorielles de la peau, établissant ainsi un modèle de neuropathie à petites fibres.
Pour commencer, mettez un équipement de protection individuelle et prenez les précautions appropriées lors de la préparation de la solution mère de résinifératoxine ou RTX. Diluez une aliquote de 600 microlitres dans une solution saline pour l’expérience, et divisez le reste en aliquotes de 12 microlitres pour le stockage. Pour les souris d’essai, utilisez des souris ICR mâles adultes de huit semaines, pesant entre 35 et 40 grammes. Administrer une dose unique de solution RTX par voie intrapéritonéale à l’aide d’une seringue de micro-injection. Ensuite, injectez un deuxième groupe de souris avec un volume égal de véhicule pour servir de contrôle. Après avoir fait toutes les injections, logez les souris dans leurs cages et assurez-vous qu’elles ont un accès improvisé à la nourriture et à l’eau.