Une technique pour infliger un traumatisme crânien fermé chez les mouches drosophiles

Prenez le contrôle et testez les mouches drosophiles adultes sous anesthésie.

Placez la mouche d’essai dans un support et tapotez-la doucement pour positionner la tête de la mouche à l’extérieur de la pointe. Assurez-vous que les pièces buccales et le corps de la mouche restent à l’intérieur du support pour éviter les blessures non ciblées.

Fixez le support à un dispositif de frappe avec la tête de la mouche vers le bas.

L’appareil est connecté à une alimentation en gaz contrôlée et contient un impacteur propulsé par gaz pour infliger des blessures.

Lancez une rafale de gaz pour propulser l’impacteur et frapper la tête de la mouche, induisant une lésion cérébrale traumatique à la tête fermée sans dommages externes.

Le stress mécanique qui en résulte endommage les neurones, altérant leur fonction.

Détachez le support pour libérer la braguette, puis transférez-la dans un flacon pour la récupérer.

Pour la mouche de contrôle, appliquez une rafale de gaz sans la frapper avec l’impacteur.

Les mouches témoins et les mouches d’essai sont maintenant prêtes à évaluer l’impact de la blessure.

Anesthésie une seule mouche femelle adulte de deux jours à l’aide de dioxyde de carbone.

À partir du tampon à dioxyde de carbone, utilisez une brosse fine pour transférer doucement la mouche dans le support.

Ensuite, tapotez doucement le support jusqu’à ce que la tête dépasse de la pointe.

Si le proboscis est exposé, utilisez une aiguille de seringue émoussée de 1 millilitre pour la rentrer doucement à l’intérieur de l’embout. Il est essentiel de garder le corps de la mouche, en particulier la partie buccale, à l’intérieur du support. Sinon, la mouche peut mourir d’endommagement des organes internes ou de l’impossibilité d’ingérer de la nourriture.

Ensuite, réglez la pression du gaz sur 100 kilopascals et ajustez le débit si nécessaire. Une fois la mouche chargée, serrez le support sur le corps de la seringue à l’aide du connecteur, de sorte que la tête de la mouche soit tournée vers le bas.

Ensuite, à l’aide de l’interrupteur à bascule, envoyez une rafale de gaz qui déplace l’impacteur pour frapper la mouche une seule fois.

Maintenant, détachez le porte-mouche et reversez la mouche sur le tampon de dioxyde de carbone.

Brossez la mouche dans un flacon vide jusqu’à ce qu’elle se rétablisse.

Conservez une mouche par flacon. La récupération ne prend que quelques minutes.

Répétez le processus pour tester quatre mouches par groupe expérimental. Le traitement de deux groupes, un test et un simulacre, ne devrait prendre que 20 à 30 minutes. Traitez les couvre-oreillers comme des animaux de laboratoire, sauf qu’il n’y a pas de barrière anti-aérosol dans le tube de l’impacteur.