Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:00 min • July 8th, 2025
Prenez une souris anesthésiée avec des micro-plaies sur le coussinet plantaire qui exposent la couche basale, la couche la plus profonde de l’épiderme.
Cette couche contient des fibres nerveuses périphériques reliées aux ganglions de la racine dorsale, ou DRG, près de la moelle épinière.
Appliquez un inoculum du virus de la pseudorage, qui cible le système nerveux, sur la plaie et frottez-le avec une tige d’aiguille pour améliorer l’adsorption.
Le virus se lie aux récepteurs de surface cellulaire, ce qui permet au virus d’entrer et de commencer à se répliquer.
Les particules virales se propagent aux cellules voisines et pénètrent dans les nerfs périphériques.
Le virus se déplace ensuite vers le DRG et se propage à travers la moelle épinière jusqu’au cerveau, infectant les neurones.
Les neurones infectés libèrent des DAMPs, activant la microglie résidente, qui sécrète des cytokines et des chimiokines pour attirer les macrophages et les neutrophiles.
Ces cellules immunitaires libèrent des espèces réactives de l’oxygène et des enzymes protéolytiques qui endommagent les neurones, entraînant une neuroinflammation.
Appliquez localement 20 microlitres du titre approprié d’inoculum viral sur le coussinet plantaire abrasé. Effectuer des inoculations simulées avec du milieu uniquement dans les coussinets plantaires abrasés des animaux témoins en parallèle. Après chaque application, frottez doucement le coussinet plantaire 10 fois avec la tige d’une aiguille pour faciliter l’absorption du virus toutes les 10 minutes pendant 30 minutes. Lorsque le coussinet plantaire abrasé est sec, laissez les souris se rétablir en les surveillant jusqu’à la décubitus sternal avant de placer les animaux dans des cages individuelles pour un suivi clinique et un échantillonnage.