Induction d’une encéphalomyélite auto-immune expérimentale dans un modèle murin

Commencez par injecter par voie sous-cutanée une émulsion contenant un peptide neuronal et un adjuvant bactérien tué par la chaleur dans une souris anesthésiée.

Dans le tissu sous-cutané, l’adjuvant attire les cellules présentatrices d’antigènes, ou APC, qui traitent et présentent les peptides neuronaux sur les principaux complexes d’histocompatibilité.

Les APC activés atteignent les ganglions lymphatiques et interagissent avec les lymphocytes T naïfs, induisant leur différenciation en lymphocytes T autoréactifs.

Ces lymphocytes T circulent et atteignent la barrière hémato-encéphalique ou BHE.

Ensuite, injectez par voie intrapéritonéale des exotoxines dérivées de bactéries.

Les exotoxines atteignent la BHE, augmentant sa perméabilité et permettant l’infiltration des lymphocytes T dans le système nerveux central (SNC).

Dans le SNC, les lymphocytes T interagissent avec les APC résidents présentant le peptide neuronal, favorisant la libération de cytokines qui induisent une nouvelle infiltration des cellules immunitaires.

Les cellules immunitaires libèrent des cytokines pro-inflammatoires, causant des dommages à la myéline.

De plus, les lymphocytes B interagissent avec les lymphocytes T et sécrètent des auto-anticorps qui endommagent davantage la myéline, établissant ainsi une encéphalomyélite auto-immune expérimentale (EAE).

Dans cette procédure, dissolvez le PTX à 2 microgrammes par millilitre dans 1x PBS et mélangez bien. Ensuite, injectez 100 microlitres de PLP/CFA dans les souris par voie sous-cutanée, deux fois à la base de la queue lors d’une courte anesthésie à l’isoflurane. Ne pas injecter dans la nuque, car toute réaction immunitaire dans la peau du haut du dos ou du cou perturbera l’imagerie de la tête et de la moelle épinière.

Une à deux heures après l’immunisation, injecter 100 microlitres de PTX dans les souris par voie intrapéritonéale.

Puis, 24 heures après l’immunisation, injectez à nouveau aux souris 100 microlitres de PTX. Pour les souris témoins, injectez deux fois 100 microlitres de CFA sans PLP, à la base de la queue.