JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurosciences
0 vues • 1:56 min • July 8th, 2025
Commencez avec une seringue contenant des cellules T-helper ou Th17 capables de reconnaître une protéine aquaporine-4 des astrocytes du SNC, y compris la moelle épinière, qui joue un rôle dans la transmission du signal au cerveau.
Injectez ces cellules Th17 dans la veine de la queue d’une souris immobilisée. Les cellules pénètrent dans la circulation sanguine et circulent dans tout le corps.
En même temps, administrer par voie intrapéritonéale une toxine bactérienne dérivée de Bordetella pertussis.
La toxine perturbe la barrière endothéliale des vaisseaux sanguins et permet aux cellules Th17 de s’infiltrer dans la moelle épinière.
Les cellules Th17 infiltrées interagissent avec les astrocytes exprimant l’aquaporine-4 et s’activent.
Ces cellules activées libèrent des cytokines pro-inflammatoires, ce qui provoque l’infiltration de cellules immunitaires mononucléaires, y compris les macrophages.
Les macrophages libèrent des molécules inflammatoires qui endommagent la gaine de myéline des fibres nerveuses environnantes.
Cette démyélinisation perturbe la transmission des signaux nerveux, entraînant une raideur de la queue et une restriction des mouvements des membres postérieurs, indiquant le début de la paralysie.
Dans l’heure qui suit leur prélèvement, transférez les cellules dans une seringue de 1 millilitre et administrez 200 microlitres de cellules à chaque animal receveur par voie intraveineuse par la veine de la queue. Ensuite, injectez immédiatement à chaque souris par voie intrapéritonéale, et deux jours plus tard, 200 nanogrammes de toxine B. pertussis diluée dans 200 microlitres de PBS.