Génération d’un modèle murin de lésion cérébrale traumatique à l’aide d’un dispositif de percussion à fluide latéral

Prenez une souris anesthésiée et appliquez une pommade pour les yeux pour éviter que ses yeux ne se dessèchent.

Rasez la tête, désinfectez le cuir chevelu et incisez dans le plan sagittal pour exposer le crâne.

Retirez la couche de tissu conjonctif et marquez la zone cible pour la blessure.

Percez pour créer un lambeau osseux, puis retirez-le pour exposer la dure-mère, l’enveloppe extérieure du cerveau.

Placez une canule sur la dure-mère et fixez-la avec du ciment dentaire.

Remplissez la canule de solution saline, en veillant à ce qu’aucune bulle d’air ne se forme, et connectez-la au tube du dispositif de percussion à fluide latéral, contenant un pendule et un réservoir rempli de liquide.

Relâchez le pendule d’un angle calibré pour frapper le réservoir, générant une impulsion de pression qui se déplace à travers le fluide et atteint le cerveau.

Le stress mécanique endommage les neurones, provoquant des lésions cérébrales traumatiques.

Retirez la canule, suturez l’incision et laissez la souris récupérer pour une analyse plus approfondie.

Pour l’induction d’un traumatisme crânien, confirmez une absence de réponse au pincement des orteils chez une souris anesthésiée et appliquez une pommade sur les yeux de l’animal. Après le rasage, désinfectez la peau exposée du cuir chevelu avec de l’éthanol à 70 % avant d’inciser le cuir chevelu dans un plan sagittal. À l’aide d’une pince, rétractez l’incision des deux côtés et séparez légèrement le périoste.

À l’aide d’un marqueur, tracez un cercle de 3 millimètres de diamètre sur la zone pariétale droite du crâne, à 2 millimètres de la ligne médiane. Utilisez une perceuse électrique pour pénétrer soigneusement le crâne sans endommager la dure-mère. Retirez le rabat osseux pour exposer une fenêtre osseuse de 3 millimètres et placez une canule de blessure en plastique sur la craniotomie.

Après avoir cimenté la canule sur le crâne avec de l’acrylique dentaire, utilisez une seringue de 5 millilitres pour remplir la canule avec une solution saline normale stérile à 0,9 %, en prenant soin d’éviter les bulles. Allumez l’oscilloscope et l’amplificateur. Confirmez que le tube haute pression du dispositif d’entrée latérale par percussion de fluide est exempt de bulles d’air et délivrez environ 10 impulsions de test jusqu’à ce que le dispositif émette un signal stable.

Ajustez l’angle de la position de départ du pendule pour atteindre une intensité d’impulsion d’environ deux atmosphères standard et connectez la canule d’entrée au dispositif de blessure à percussion de fluide latéral. Appuyez sur la gâchette pour libérer le pendule, induisant la lésion cérébrale. Ensuite, obtenez et transmettez une impulsion à la dure-mère à travers l’ensemble du système de tuyauterie fermé rempli de liquide.

Après l’induction d’une lésion cérébrale, retirez la canule et suturez l’incision. Ensuite, placez la souris sur un coussin chauffant avec surveillance jusqu’à ce qu’elle soit ambulatoire, avant de ramener l’animal dans sa cage d’origine avec un accès ad libitum à la nourriture et à l’eau.