Génération d’un modèle murin de lésion cérébrale traumatique à l’aide d’un dispositif d’impact

Prenez une souris anesthésiée avec le crâne exposé.

Identifiez les sutures sagittales et coronales, qui sont des articulations du crâne, pour localiser le site cible de la blessure.

Percez le crâne et retirez le rabat osseux pour exposer la dure-mère, la couche protectrice du cortex cérébral.

Fixez la souris dans un cadre stéréotaxique avec un dispositif d’impact attaché.

Positionnez l’extrémité de l’impacteur sur la zone exposée pour infliger un traumatisme crânien.

Abaissez la pointe pour entrer en contact avec la dure-mère, rétractez-la pour définir une profondeur d’impact et appliquez la blessure.

Retirez l’impacteur et retirez la souris du cadre.

Contrôlez les saignements du site de la blessure, puis fermez le cuir chevelu à l’aide d’un adhésif chirurgical.

Administrer un analgésique par voie sous-cutanée pour soulager la douleur et permettre à la souris de récupérer.

La blessure provoque des dommages progressifs au cortex et aux régions sous-jacentes de l’hippocampe et du thalamus, ainsi qu’une accumulation de liquide, altérant les fonctions cognitives et la coordination motrice.

Pour induire une lésion cérébrale traumatique corticale contrôlée, utilisez d’abord un scalpel pour faire une incision de 1 centimètre le long de la ligne médiane du cuir chevelu pour exposer le crâne. Rétractez le cuir chevelu du site opératoire et identifiez les sutures sagittales et coronales sur le crâne exposé.

Pour effectuer une craniectomie, équipez une micro-perceuse d’un foret trépan de 5 millimètres, pour activer la perceuse à vitesse maximale et appliquer le foret perpendiculairement au crâne, à 2 millimètres à gauche de la suture sagittale et à 2 millimètres rostral à la suture coronale avec une pression douce et uniforme. Une légère fléchissement se fera sentir lorsque la perceuse pénétrera dans le crâne.

À l’aide d’une pince et d’une aiguille hypodermique de petit calibre, vous pouvez retirer le lambeau osseux, exposant ainsi complètement la dure-mère sous-jacente, et faites pivoter l’extrémité de l’impacteur dans le champ opératoire. Fixez les os temporaux bilatéraux entre les barres d’oreille miniatures du cadre stéréotaxique et verrouillez les incisives à l’intérieur de la pince d’incisive pour créer une prise stable en trois points sur la tête de la souris. Abaissez la pointe jusqu’à ce qu’elle entre en contact avec la dure-mère exposée. Le capteur de contact de l’instrument émettra une tonalité audible pour alerter qu’un contact a été établi.

Rétractez l’extrémité de l’impacteur à partir du point zéro et abaissez la position de l’impacteur sur le cadre stéréotaxique pour régler la profondeur d’impact souhaitée. Activez ensuite l’impacteur sur le dispositif d’actionnement avant de faire pivoter le dispositif hors du champ pour permettre à l’animal d’être retiré du cadre.

Immédiatement après la blessure, appliquez une pression directe à partir d’un applicateur stérile à embout de coton sur le crâne et la surface corticale blessée pour contrôler tout saignement, et utilisez un applicateur frais pour sécher le crâne. Fermez le cuir chevelu au-dessus de la craniectomie selon les techniques standard et administrez une analgésie postopératoire. Ensuite, placez l’animal en position de récupération latérale des escarres dans une cage propre et préchauffée avec surveillance jusqu’à ce qu’il déside complètement, et mesurez le poids corporel tous les trois jours tout au long de l’expérience.