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Neurosciences
0 vues • 3:43 min • July 8th, 2025
Prenez une seringue remplie de lévodopa, un précurseur de la dopamine et un inhibiteur de la conversion de la dopamine.
Injectez cette solution dans le tissu sous-cutané d’un rat immobilisé atteint de la maladie de Parkinson, présentant des neurones producteurs de dopamine endommagés.
Chez le rat, l’inhibiteur se lie aux enzymes productrices de dopamine et empêche la conversion prématurée de la lévodopa en dopamine.
La lévodopa pénètre dans la circulation sanguine, traverse la barrière hémato-encéphalique via les canaux d’acides aminés et pénètre dans les neurones producteurs de dopamine non endommagés.
Les enzymes de ces neurones convertissent la lévodopa en dopamine, un neurotransmetteur excitateur, et la libèrent dans la synapse.
La dopamine se lie à ses récepteurs sur les neurones post-synaptiques, déclenchant la transmission du signal.
Répétez les injections périodiquement pour augmenter la production de dopamine.
Au fil du temps, un excès de dopamine entraîne une surstimulation de ses récepteurs et une signalisation neuronale excessive, ce qui finit par perturber les mouvements du corps du rat.
Placez le rat dans une cage et observez son comportement. Le rat présente des mouvements corporels involontaires et répétitifs, connus sous le nom de dyskinésies, induits par la lévodopa.
Avant l’injection de L-DOPA, ajoutez le volume approprié de solution saline stérile au mélange de L-DOPA et de bensérazide pré-pesé et lyophilisé dans le flacon ambré, et agitez bien pendant 10 secondes. Immédiatement après la préparation, remplissez le volume requis de mélange L-DOPA-bensérazide pour chaque animal dans des seringues individuelles, montées avec une aiguille de calibre 26, et étiquetez chaque seringue avec une identification individuelle de l’animal.
Après avoir amené la première cage sur le banc d’injection, retirez le rat de sa cage pour le placer sur la surface d’injection. Utilisez la main non dominante pour retenir la tête et les épaules du rat avec la paume contre la surface, et frottez la peau du dos recouvrant les omoplates avec le pouce et l’index. Utilisez la main dominante pour injecter le volume de L-DOPA dans l’espace sous-cutané entre les doigts, en gardant l’aiguille parallèle au corps pour éviter l’injection intramusculaire.
Après l’injection, déplacez le rat dans la cage. Ensuite, réglez la minuterie sur une à deux minutes et répétez la procédure, en injectant un rat toutes les une à deux minutes jusqu’à ce que tous les rats soient injectés. Le jour de l’évaluation, placez une minuterie à côté de la cage pour observer la dyskinésie induite par la lévodopa, ou l’intensité du comportement de la LID, tout en estimant la fréquence d’un comportement donné pendant la période d’évaluation.
Évaluez l’intensité et la fréquence des mouvements de dyskinésie dystonique et hyperkinétique, y compris l’apparition initiale du comportement de la LID, le comportement de pointe et la phase de déclin au nombre de points temporels souhaité. Si vous utilisez des intervalles d’évaluation d’une minute, réglez une minuterie sur une minute pour évaluer le premier rat, et continuez l’évaluation pour tous les rats à des intervalles d’une minute.