Déclenchement et surveillance des crises induites par la chaleur dans un modèle de souris transgénique

Prenons l’exemple d’une souris adulte transgénique anesthésiée porteuse d’une mutation génétique qui entraîne un dysfonctionnement des canaux sodiques dans les interneurones inhibiteurs.

Fixez une sonde rectale lubrifiée pour surveiller sa température corporelle.

Placez la souris dans une cage de récupération jusqu’à ce que sa température corporelle se stabilise.

Ensuite, transférez l’animal dans une chambre chauffante préchauffée et commencez l’enregistrement vidéo.

Augmentez la température de la chambre à intervalles réguliers tout en surveillant l’augmentation progressive de la température corporelle de la souris.

À mesure que la température corporelle augmente, le dysfonctionnement des canaux sodiques s’aggrave, réduisant la libération de neurotransmetteurs inhibiteurs.

Cette libération réduite perturbe l’équilibre entre l’excitation neuronale et l’inhibition, entraînant une hyperexcitabilité neuronale et des convulsions.

Notez la température corporelle pendant la crise et notez ses caractéristiques comportementales.

Maintenant, placez la souris sur un coussin de refroidissement jusqu’à ce que sa température corporelle se normalise.

Enfin, retirez la sonde rectale et laissez la souris récupérer.

Commencez par allumer la chambre de chauffe de la souris, avec le bouton de mise sous tension, puis appuyez sur le bouton de mise sous tension. À l’aide du clavier du contrôleur de température numérique, réglez la température de la chambre de chauffe sur 50 degrés Celsius. Tapisser le sol de la chambre chauffante avec de la litière en épis.

Montez une caméra d’enregistrement vidéo devant la chambre thermique. Tapissez une boîte de Pétri de 140 millimètres de diamètre d’épaisses couches de papier de soie et placez-la sur de la glace pour servir de coussin de refroidissement. Pour le test de dépistage, assurez-vous que le poids corporel de la souris est de 15 grammes ou plus. Avant de commencer la procédure, vérifiez que la souris est complètement anesthésiée avec un pincement des orteils.

Enduisez l’extrémité métallique de la sonde de température rectale d’un lubrifiant et insérez-la doucement dans la souris. Fixez la sonde rectale à la queue de la souris avec du ruban adhésif. Placez la souris dans une nouvelle cage de récupération doublée de litière en épi. Démarrez une minuterie et observez la souris pendant 5 minutes tout en surveillant la température corporelle centrale jusqu’à ce que la souris se remette complètement de l’anesthésie et que la température se stabilise à 35 à 36 degrés Celsius.

Au bout de 5 minutes, notez la température corporelle de la souris comme la température corporelle initiale à 0 minute. Transférez rapidement la souris sur le sol de la chambre de chauffe de la souris préchauffée pour commencer l’essai de l’expérience. Une fois la souris placée dans la chambre de souris préchauffée, démarrez la caméra et le chronomètre.

Augmentez la température de la chambre chauffante à intervalles réguliers, de sorte que la température corporelle de la souris augmente de 0,25 à 0,5 degré Celsius par minute. Commencez à enregistrer la température corporelle de la souris à des intervalles de 1 minute pendant toute la durée de l’expérience. À 9,5 minutes, réglez la température de la chambre chauffante à 55 degrés Celsius, pour stabiliser la température de la chambre chauffante à 55 degrés Celsius à la 10e minute.

De même, atteignez une température stable de la chambre chauffante à 60 degrés Celsius à la 20e minute. Chaque essai de dépistage des crises dure 30 minutes. Si la souris fait une crise, notez la température corporelle de la souris pendant la crise comme température seuil de la crise. Prenez note des caractéristiques de comportement de crise affichées par la souris.

Ensuite, récupérez rapidement la souris de la chambre et placez-la sur le coussin de refroidissement. Lorsque la température corporelle de la souris descend à 36 à 37 degrés Celsius, transférez la souris dans une cage de récupération. Pour retirer la sonde rectale de la souris, coupez soigneusement le ruban adhésif entre la queue de la souris et le fil de la sonde rectale.