Coloration immunohistochimique de la protéine S-100 dans les coupes de biopsie par aspiration rectale humaine

Prenez des coupes fixes de biopsie rectale humaine avec des antigènes protéiques exposés et des peroxydases endogènes inactivées.

Ajoutez une solution bloquante pour empêcher la liaison d’anticorps non spécifiques.

Remplacez la solution bloquante par des anticorps primaires qui se lient à la protéine de cellule gliale cible, S-100, un marqueur de la maladie de Hirschsprung.

Retirez les anticorps non liés et incubez avec des polymères de peroxydase pour amplifier le signal.

Laver pour enlever l’excès de polymère. Ajoutez des anticorps secondaires qui se lient aux polymères enzymatiques et aux anticorps primaires.

Retirez les anticorps non liés et ajoutez un substrat chromogène.

Les peroxydases réagissent avec le substrat, formant un précipité coloré.

Rincer pour éliminer l’excès de précipité.

Ajoutez un colorant pour tacher les noyaux.

Laver avec une solution d’éthanol acide pour éliminer l’excès de colorant.

Ensuite, déshydratez les sections en utilisant des concentrations croissantes d’éthanol suivi de xylène.

Enfin, montez et observez au microscope pour visualiser la coloration indiquant la présence de la protéine cible.

Jetez l’excès d’albumine sérique bovine et étiquetez les ce