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Commencez avec un rat anesthésié avec une artère carotide commune droite faiblement suturée, ou ACC, dans la région du cou.
Cet ACC se ramifie dans l’artère cérébrale moyenne, ou ACM, fournissant du sang oxygéné au cerveau.
Repositionnez le rat latéralement et faites une incision entre l’œil droit et l’oreille.
Rétractez la peau et disséquez le muscle pour exposer le crâne. Positionnez un goutteur de solution saline et un aspirateur pour le lavage.
Percez sur le crâne et retirez le rabat osseux. Ensuite, coupez la couche protectrice pour exposer le MCA.
À l’aide d’une pince à diathermie, appliquez de la chaleur pour coaguler le MCA droit en plusieurs points, puis coupez-le au point de croisement veineux.
La coagulation provoque une occlusion artérielle, réduisant le flux sanguin oxygéné vers le cerveau, induit une ischémie et conduit à la mort neuronale.
Couvrez le cerveau exposé.
Réexposez le cou, puis ligaturez fermement le CCA droit. Cela empêche le flux sanguin permanent vers le MCA et intensifie l’ischémie.
Incisez la peau au milieu de l’orbite droite et du conduit auditif externe. Ensuite, disséquez le muscle temporal pour révéler le crâne. Ensuite, à l’aide d’un maximum de cinq écarteurs à crochet élastiques de 3 millimètres, rétractez et épinglez la peau à la planche de liège. Ensuite, placez une perfusion saline entraînée par gravité au-dessus du site ouvert au point le plus élevé du crâne près de l’oreille, et installez un système d’aspirateur avec une buse au point le plus bas pour éliminer tous les débris osseux et éliminer tout saignement mineur du site exposé.
Ajustez la roue pour visualiser la source du saignement si nécessaire. Maintenant, utilisez une perceuse dentaire avec une fraise de foret grossière de 1,6 millimètre recouverte de diamant à environ 8 000 tr/min pour effectuer une craniotomie de 5 millimètres sur 5 millimètres sur la région exposée, en prenant soin d’appliquer une pression circulaire et latérale mais pas vers le bas pendant le forage. Lorsqu’il devient complètement transparent, utilisez une pince pour retirer l’os. Ensuite, à l’aide d’un crochet dural fait maison, ouvrez soigneusement la dure-mère en prenant soin de ne pas rompre les gros vaisseaux sanguins de surface.
Ensuite, utilisez une paire de pinces à diathermie bijou coudées avec des pointes pointues de 0,25 millimètre pour coaguler le MCA à partir de l’endroit où la veine cérébrale inférieure traverse jusqu’au point de bifurcation de l’artère, puis le long de la branche caudale du MCA, jusqu’à ce que les vaisseaux soient complètement occlus. Ensuite, pour confirmer que l’occlusion est complète, utilisez des ciseaux microvasculaires pour couper la section de l’ACM occlus qui se trouve sous l’endroit où la veine cérébrale inférieure traverse l’ACM. Maintenant, couvrez la zone exposée avec un tampon de gaze imbibé de solution saline et remettez le rat en position couchée. Rouvrez la suture lâchement attachée sur le cou pour réexposer les artères carotides, et faites un nœud dans la suture autour de l’artère du même côté que le MCA occlus pour ligaturer définitivement le vaisseau.
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