Immunohistochimie pour l’identification de la région du locus coeruleus dans des coupes de cerveau de souris
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:14 min • July 8th, 2025
Les régions du locus coeruleus, situées bilatéralement dans le tronc cérébral de la souris, contiennent des neurones producteurs de noradrénaline et régulent diverses régions du cerveau.
Pour détecter ces régions du locus coeruleus, commencez par utiliser une lame de verre portant les sections fixes et cryoconservées du tronc cérébral de la souris.
Lavez la lame avec un tampon pour éliminer les traces de fixateur.
Ajoutez un tampon contenant du détergent et incubez pour perméabiliser les membranes, puis lavez.
Introduire des anticorps primaires spécifiques de l’enzyme dopamine β-hydroxylase, qui convertit la dopamine en noradrénaline, un neurotransmetteur.
Incuber pour permettre aux anticorps d’interagir avec la dopamine β-hydroxylase.
Laver pour éliminer les anticorps non liés.
Ensuite, ajoutez des anticorps secondaires verts couplés à un fluorophore et incubez dans l’obscurité.
Les anticorps secondaires se lient aux anticorps primaires, puis se lavent.
Ajoutez du support de montage sur les sections cérébrales, puis couvrez et séchez.
Observez les lames au microscope à fluorescence.
La fluorescence verte représentant les neurones producteurs de noradrénaline marqués dans les secti
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques