Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:29 min • July 8th, 2025
Prenez une souris anesthésiée implantée avec une canule guide dans son cerveau.
Une sonde factice à l’intérieur de la canule empêche l’entrée de débris tissulaires.
Placez un collier autour du cou de la souris.
Remplacer la sonde factice par une sonde de microdialyse contenant une membrane semi-perméable spécialisée, qui permet l’écoulement de molécules de poids moléculaire élevé.
La sonde est reliée aux pompes par des orifices d’entrée et de sortie pour réguler le débit d’un tampon physiologique.
Attachez la souris à l’intérieur d’une cage à l’aide du collier, laissez-la récupérer et lancez le flux.
Le tampon pénètre dans le tissu cérébral par l’entrée et se mélange au liquide interstitiel, ou ISF, dans l’espace extracellulaire, qui contient des protéines impliquées dans la communication cellulaire.
Les composants se diffusent à travers la membrane et sont collectés par la sortie en fractions.
L’ISF collecté, contenant des protéines extracellulaires, est prêt à être analysé.
Placez le collier autour du col de la canule guide anesthésiée implantée chez l’animal, et retirez l’écrou borgne et la sonde factice. Insérez lentement la sonde de microdialyse dans la canule de guidage et fixez l’écrou borgne.
Ensuite, placez la souris dans une cage connectée à un système de mouvement libre et attachez la souris avec le collier. Après au moins une heure, arrêtez séquentiellement la pompe à rouleaux et le pousse-seringue, en redémarrant les pompes avec le pousse-seringue réglé à 20 % plus vite que la pompe à rouleau, et placez l’extrémité libre du tube de sortie sur un collecteur de fractions réfrigéré pour recueillir le cerveau ISF. Lorsque le volume expérimental approprié a été obtenu, retirez la sonde et manipulez la récupération de la souris comme nous venons de le démontrer.