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Neurosciences
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Commencez par ajouter une suspension froide de glioblastome et de cellules microgliales, chacune colorée avec un colorant fluorescent distinct, dans une solution froide de matrice polymère.
L’état froid empêche la polymérisation prématurée de la matrice.
Ensuite, transférez le mélange dans une chambre poreuse insérée à l’intérieur d’une plaque de culture.
Incuber pour permettre la polymérisation matricielle, formant un gel qui intègre les cellules.
Ajoutez un milieu sans sérum dans l’insert et un milieu de croissance contenant du sérum dans le puits ci-dessous, puis incuber.
Les facteurs chimiques présents dans le sérum favorisent la migration cellulaire vers les milieux riches en sérum.
De plus, la microglie sécrète des molécules de signalisation qui interagissent avec les cellules du glioblastome.
Cela améliore la migration des cellules de glioblastome vers la face inférieure de l’insert poreux, ressemblant à leur migration d’une tumeur vers les tissus environnants.
Retirez les cellules du haut de la chambre.
Maintenant, fixez les cellules restantes avec un fixateur et lavez-les avec un tampon. La fluorescence distincte des cellules aide à suivre la migration cellulaire.
Décongel
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