Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
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Commencez par un insert de membrane contenant des cellules endothéliales microvasculaires du cerveau de souris, ressemblant à une barrière hémato-encéphalique in vitro.
Placez cet insert dans un puits d’instrument à résistance électrique transendothéliale ou TEER contenant une électrode intégrée.
Ajoutez du fluide frais dans le compartiment inférieur.
Placez le couvercle avec des électrodes sur les puits TEER, puis placez l’instrument dans un incubateur et connectez-le à un système d’enregistrement.
Les électrodes génèrent un courant électrique à travers la couche cellulaire pour la mesure de la résistance transendothéliale.
Des protéines jonctionnelles intactes entre les cellules entravent la circulation du courant, ce qui entraîne une valeur TEER plus élevée.
Débranchez l’instrument et retirez-le.
Démontez le couvercle, retirez un peu de fluide du compartiment supérieur et ajoutez des lymphocytes T pré-activés. Remontez l’instrument pour la mesure TEER.
Les lymphocytes T activés interagissent avec les cellules endothéliales, libérant des facteurs inflammatoires et des enzymes cytolytiques, perturbant l’intégrité jonctionnelle.
Cette perturbation augmente le flux de courant électr
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