Un modèle in vitro pour l’étude du passage d’agents pathogènes de la barrière hémato-encéphalique et de l’infection des cellules cérébrales

Prenons l’exemple d’un modèle in vitro de barrière hémato-encéphalique, ou BHE, composé de deux compartiments séparés par une membrane poreuse.

Le compartiment supérieur ou luminal contient des cellules endothéliales microvasculaires. Ces cellules expriment des jonctions serrées, imitant l’endothélium de la barrière hémato-encéphalique qui limite le passage des cellules et des molécules.

Le compartiment inférieur ou abluminal contient des neurones, des astrocytes et des microglies, représentant le parenchyme cérébral.

Introduire un virus neurotrope dans le compartiment luminal pour simuler une infection transmissible par le sang et incuber.

Le virus est endocytosé par les cellules endothéliales, subit un trafic intracellulaire à l’intérieur des vésicules et est libéré du côté abluminal.

Après l’incubation, retirez la chambre supérieure. Prélever un échantillon du milieu du côté abluminal pour évaluer la quantité virale, confirmant ainsi le franchissement réussi de la couche endothéliale.

Ajouter du milieu frais et incuber à nouveau.

Le virus pénètre dans les cellules neurales par endocytose, se réplique et libère une descendance virale.

Quantifier l’augmentation de la charge virale