Technique d’ablation guidée par stéréotaxie pour l’ablation du cortex auditif chez le rat

Prenez un rat anesthésié fixé dans un cadre stéréotaxique.

Rasez et désinfectez le cuir chevelu, puis faites une incision pour exposer le crâne.

Identifiez les références anatomiques le bregma, le lambda et la ligne interaurale pour localiser le cortex auditif, la région du cerveau qui traite les signaux sonores.

Inciser et rétracter le muscle temporal, révélant l’os temporal.

Positionnez une aiguille au milieu de la ligne interaurale. À l’aide de ce point de repère, déterminez les coordonnées au-dessus du cortex auditif.

Percez la région marquée et retirez l’os pour exposer le cerveau.

Coupez à travers les méninges, les couches recouvrant le cerveau.

Réaliser l’ablation en aspirant les couches corticales tout en préservant la substance blanche. L’ablation du cortex auditif perturbe la capacité de traitement du signal sonore.

Remplacez l’os excisé, appliquez de la gaze pour contrôler les saignements et suturez la peau.

Appliquez une pommade antibiotique pour prévenir l’infection et administrez des analgésiques sous-cutanés pour soulager la douleur.

Laisser le rat se rétablir pour évaluer l’impact de l’ablation.

Pour commencer cette procédure, placez le rat anesthésié sur un coussin chauffant pour maintenir sa température corporelle. Stabilisez ensuite la tête de l’animal dans un cadre stéréotaxique à l’aide de deux barres d’oreille et d’une barre de morsure. Rasez le cuir chevelu et désinfectez la zone chirurgicale avec de la povidone iodée.

À l’aide d’un scalpel, faites une incision le long de la ligne médiane pour exposer le crâne et rétractez le périoste recouvrant la surface du crâne. Après cela, utilisez un coton-tige stérile pour retirer délicatement tout sang recouvrant la surface du crâne afin de visualiser le bregma, le lambda et la ligne interaurale. Faites une incision dans le muscle temporal près de son insertion dorsale sur le crâne avec un scalpel. Après cela, tirez le muscle à l’aide d’une aiguille et d’un matériau de suture et fixez le matériau de suture au cadre stéréotaxique afin d’exposer l’os temporal.

Abaissez lentement une aiguille droite stérile jusqu’à ce qu’elle soit juste au-dessus de la surface du crâne, de sorte que la pointe de l’aiguille soit réglée sur le zéro interaural. Définissez ce point sur zéro. Ensuite, ciblez l’AC à l’aide de quatre points. Abaissez ensuite l’aiguille à droite au-dessus de l’os temporal pour visualiser chacun de ces quatre points. Marquez les points avec un marqueur sur l’os temporal et reliez-les afin de dessiner un rectangle. Le rectangle servira de guide pour ouvrir une fenêtre dans l’os.

Dans cette procédure, ouvrez la fenêtre à l’aide d’une perceuse électrique et d’un petit foret. Percez le périmètre du rectangle à 8 000 tr/min jusqu’à ce que l’os cède. Refroidissez la surface de forage en la rinçant avec une solution saline stérile froide pour éviter d’endommager les structures sous-corticales. Lorsque l’os cède, veillez à ne pas percer le cerveau.

Lorsque les bords sont lâches, tirez l’os de couverture avec une pince fine et rangez-le dans une solution saline froide et stérile. À l’aide d’un microscope chirurgical, coupez doucement les méninges à l’aide d’un couteau microchirurgical et retirez-les à l’aide de deux pinces à pointe fine. En cas de saignement, rincez le site chirurgical avec une solution saline stérile et froide.

Ensuite, aspirez doucement l’AC à l’aide d’un dispositif d’aspiration chirurgical couplé à une aiguille stérile à pointe émoussée de calibre 20. Aspirez uniquement les six couches corticales et non la substance blanche sous-jacente. Ce point est critique et doit être effectué avec beaucoup de soin. Lorsque l’aspiration est terminée, couvrez le site chirurgical avec l’os extrait et appliquez une gaze hémostatique résorbable.

Laissez le muscle temporal retrouver sa position d’origine, puis suturez la peau à l’aide de pinces à plaie. Après cela, appliquez une pommade antibiotique sur la plaie. Par la suite, injectez de la buprénorphine par voie sous-cutanée dans le dos du rat comme analgésique, une heure et huit heures après la fin de la chirurgie. Gardez l’animal sur le coussin chauffant jusqu’à ce qu’il se réveille et retournez-le dans sa cage d’hébergement pour qu’il se rétablisse.