Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:55 min • July 8th, 2025
Décongelez une section de tissu cérébral de rat congelé.
Ajoutez un tampon et émincez le tissu. Ensuite, transférez-le dans un tube contenant un tampon et mélangez.
Centrifugez le mélange et jetez le surnageant.
Ajoutez une solution enzymatique protéolytique au tissu et mettez-la en suspension à l’aide d’une pipette de grand diamètre.
Incuber le mélange pour décomposer la matrice extracellulaire, en desserrant les cellules neurales.
Centrifugez le mélange et jetez le surnageant.
Remettez en suspension les fragments de tissu dans un tampon réfrigéré et pipetez-les à plusieurs reprises pour dissocier les cellules.
Laissez les débris et les cellules non dissociées se déposer, puis transférez la suspension unicellulaire dans un nouveau tube.
Transférez les cellules dans de l’éthanol glacé et mélangez. Incuber pour fixer et perméabiliser les cellules.
Centrifugez la suspension et jetez le surnageant.
Remettez les cellules neurales en suspension dans un tampon froid pour une analyse plus approfondie.
Pour hacher le tissu, laissez les échantillons décongeler sur une plaque de verre froide pendant 1 minute maximum avant de les recouvrir d’une à deux gouttes de solution tampon A. Ensuite, e
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