Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:13 min • April 28th, 2025
Prenez une mouche aux yeux blancs, anesthésiée, transgénique et adaptée à l’obscurité.
La mouche exprime des canaux ioniques TRPL marqués eGFP dans les photorécepteurs de l’œil.
Dans l’obscurité, TRPL se localise dans les membranes des rhabdomères— les microvillosités des photorécepteurs.
À l’aide d’air comprimé, enfoncez la mouche la tête la première dans la pointe d’une pipette.
Coupez la pointe et poussez la braguette vers l’arrière.
Coupez-le à nouveau et poussez la braguette vers l’avant jusqu’à ce que seule sa tête ressorte.
Immobilise la pointe dans de la pâte à modeler collée à une lame et place-la sur une platine de microscope à fluorescence, l’œil faisant face radialement à l’objectif du microscope.
Ajoutez une goutte d’eau à l’objectif, puis abaissez-la jusqu’à ce qu’elle touche l’œil.
Capturer des images des photorécepteurs.
Mesurez les intensités de fluorescence dans les rhabdomères, le corps cellulaire et l’arrière-plan.
Illumine la mouche avec une lumière orange pour induire la translocation TRPL vers le corps cellulaire.
Répétez les mesures d’imagerie et de fluorescence.
Comparez les images pour observer une fluorescence rhabdomère réduite post-illumination, indiquant la tran
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