Modélisation de traumatismes crâniens répétitifs dans un modèle de souris

Commencez par fixer la pointe d’impact et la pointe de la sonde à un dispositif d’impact.

Ensuite, sécurisez une souris anesthésiée dans un cadre stéréotaxique.

Positionne la pointe d’impact entre les sutures interfrontales et lambdoïdes, alignée verticalement avec une ligne horizontale imaginaire entre les oreilles.

Zéro les canaux X et Y sur le panneau de commande stéréotaxique pour éviter le déplacement central de l’impact lors du changement des pointes.

Déplacez manuellement la pointe de la sonde vers le centre de l’impact et abaissez-la pour toucher le site de l’impact. Fixez un capteur de contact à la queue de la souris.

Zéro le canal Z, puis repositionnez la pointe d’impact jusqu’à ce que X et Y soient nuls et que Z indique moins quatre.

Applique l’impact à une vitesse spécifique.

Mesurez l’apnée (le temps écoulé entre l’impact et la première respiration de la souris) pour déterminer la gravité de la blessure.

Permet à la souris de récupérer.

Répète l’impact à des intervalles spécifiés. Des impacts répétés rompent les vaisseaux sanguins du cerveau, provoquant des microsaignements et déclenchant l’activation des astrocytes, imitant une légère commotion cérébrale semblable à celle de l’homme.

Commencez par fixer une pointe métallique recouverte de caoutchouc de silicone sur mesure, à un dispositif d’impact stéréotaxique électromagnétique. En veillant à ce que le fond plat de la pointe revêtue soit parallèle à la surface de la pointe de la sonde du dispositif d’impact. Ensuite, placez une souris anesthésiée en position couchée sur un coussin chauffant et confirmez une absence de réponse au pincement des orteils.

Ensuite, utilisez une tondeuse à cheveux pour raser complètement la tête et appliquez une pommade sur les yeux de l’animal. Lorsque l’animal est prêt, préréglez la vitesse de l’appareil d’impact à 4 mètres par seconde et le temps de séjour à 240 millisecondes sur le boîtier de commande. Placez un coussin chauffant doux sous le corps de l’animal, pour maintenir la température corporelle près de 39 degrés Celsius.

Ensuite, utilisez les barres d’oreille à extrémité émoussée pour monter la souris dans le cadre stéréotaxique, en position couchée. Utilisez le pilote z pour abaisser la pointe de l’impact, près de la tête de la souris. Déplacez les haut-parleurs x et y, à mi-chemin des coordonnées cibles, au-dessus de la suture sagittale, pour ajuster la pointe plate de 9 millimètres de diamètre.

En veillant à ce qu’un bord de la pointe d’impact soit parallèle verticalement à une ligne horizontale imaginaire, tracée entre les deux oreilles. Pour régler correctement la profondeur d’impact, réglez d’abord les canaux x et y sur le panneau de commande stéréotaxique numérique à zéro, pour vous assurer qu’il n’y a pas de décalage du centre d’impact après avoir changé les pointes.

Ensuite, déplacez la pointe de la sonde supplémentaire sur le site d’impact du cerveau de la souris. Ajustez manuellement les pilotes x et y pour déplacer la pointe de la sonde au centre de la zone d’impact et fixez un capteur de contact à la queue. Utilisez le pilote z pour déplacer l’impacteur vers le bas, jusqu’à ce que la pointe de la sonde touche la surface du site d’impact, et réglez le canal z sur le panneau de commande stéréotaxique sur zéro.

Ensuite, utilisez les pilotes x et y pour déplacer manuellement la pointe d’impact vers la zone d’impact, jusqu’à ce que les pilotes x et y soient nuls. Ensuite, déplacez le lecteur z vers le bas jusqu’à ce que le panneau de configuration indiquant le pilote z soit à moins 4,00. Et déplacez l’interrupteur de rétraction sur le boîtier de commande pour rétracter l’actionneur.

Maintenant, cliquez sur l’interrupteur d’impact sur le boîtier de commande pour déclencher un impact avec une profondeur de déformation de 4 millimètres, et utilisez une minuterie pour mesurer le temps entre l’impact et le premier souffle de la souris. Ensuite, transférez l’animal dans un coussin chaud, avec surveillance jusqu’à ce qu’il soit complètement rétabli.