Induction de la douleur neuropathique dans un modèle de rat par constriction du nerf infra-orbitaire

Sécurise un rat anesthésié avec un crâne rasé dans un cadre stéréotaxique. Appliquez une pommade sur les yeux pour éviter le dessèchement et couvrez avec un champ chirurgical

Désinfectez la tête et incisez pour exposer le crâne.

À l’aide d’un microscope de dissection, visualisez l’une des orbites de l’œil, la cavité osseuse du crâne qui abrite l’œil.

Déviez les tissus mous environnants pour exposer le nerf infra-orbitaire, qui transmet les signaux sensoriels du visage au cerveau.

Attachez deux ligatures autour du nerf infra-orbitaire pour le resserrer et induire des lésions nerveuses.

Suture l’incision du cuir chevelu et permet au rat de récupérer.

Suite à la constriction nerveuse, les neurones endommagés libèrent des molécules de signalisation qui recrutent des cellules immunitaires.

Ces cellules immunitaires libèrent des médiateurs qui se lient aux nocicepteurs intacts voisins, des neurones sensoriels qui transmettent la douleur.

Ce médiateur sensibilise les nocicepteurs, augmentant l’excitabilité neuronale et générant des signaux de douleur qui se propagent au cerveau, contribuant ainsi à la douleur neuropathique.

En préparation, coupez deux morceaux de six centimètres de ligature chromique en boyau 5-0. Conservez-les dans un plat de solution saline stérile afin qu’ils ne se raidissent pas. Après avoir confirmé que le rat est anesthésié par l’absence de réponse réflexe, commencez à le préparer à la chirurgie en lui rasant la tête pour une incision au milieu du cuir chevelu. Rasez-vous à un rayon de 25 millimètres à partir du point central des yeux.

Ensuite, fixez la tête du rat dans un cadre stéréotaxique et placez un coussin chauffant sous le corps du rat. Ensuite, appliquez une pommade ophtalmique. Et nettoyez la zone rasée avec une alternance de gommages à l’alcool et à la bétadine. Commencez la chirurgie par une incision médiane du cuir chevelu pour exposer le crâne et l’os nasal.

Procédez à l’opération à l’aide d’un microscope de dissection. Ensuite, à l’aide d’une pince, libérez le bord de l’orbite formé à partir des os maxillaire, frontal, lacrymal et zygomatique. De plus, prélevez du sang au besoin.

Maintenant, pour accéder à l’IoN, déviez doucement le contenu orbital avec un coton-tige de précision. Ce faisant, n’étirez pas trop le nerf ethmoïdal antérieur, qui passe au-dessus de l’IoN. Ensuite, à l’aide d’une pince, utilisez un mouvement d’étalement pour disséquer l’IoN du tissu conjonctif environnant. Frottez toujours les saignements au besoin.

Maintenant, placez le morceau de ligature entre l’IoN et l’os frontal en poussant une extrémité vers le bas le long de l’os frontal, médialement à l’IoN, puis en l’avançant de quelques millimètres parallèlement à l’IoN, en restant inférieur à l’IoN. Ensuite, glissez la pointe d’une pince inclinée à 45 degrés sous l’IoN, près de la ligature, et rétractez doucement l’IoN latéralement, révélant la ligature et les pointes de la pince.

Saisissez la ligature et passez-la sous l’IoN, en la tirant jusqu’à ce que les longueurs exposées soient égales. Ensuite, faites les extrémités avec un nœud coulant et glissez le nœud sur l’IoN. Contractez visiblement légèrement le nerf et terminez le nœud pour qu’il ne puisse pas glisser davantage.

Maintenant, coupez les extrémités libres de la ligature et placez une autre ligature en utilisant la même technique, à deux millimètres de la première ligature. Confirmez visuellement le bon placement des ligatures.

Terminez la chirurgie en fermant le cuir chevelu avec une suture en polyester 4-0. Ensuite, surveillez le rat pendant qu’il récupère sur un coussin chauffant. Lorsqu’il a retrouvé sa position couchée sternale, remettez-le dans une cage appropriée. Le rat doit être logé seul jusqu’à ce qu’il soit complètement rétabli.