Analyse LC-MS/MS du profil protéomique de granules de neuromélanine isolés dans le tissu cérébral humain

Commencer avec des peptides dérivés de granules de neuromélanine (NMG) isolés de tissu cérébral humain post-mortem.

Les NMG, présents dans les neurones producteurs de dopamine, contiennent des pigments, des protéines et des lipides de neuromélanine.

Prenez une colonne de chromatographie liquide à haute performance (HPLC) contenant une phase stationnaire à base de silice fonctionnalisée avec des ligands hydrophobes.

Charge les peptides sur la colonne.

Les peptides hydrophobes se lient plus fortement à la colonne que les peptides hydrophiles.

Passe un tampon d’élution à travers la colonne.

Les peptides moins hydrophobes éluent en premier, tandis que les peptides plus hydrophobes éluent plus tard.

Les peptides élués entrent dans la source d’ionisation par électronébulisation du spectromètre de masse, où ils sont ionisés en ions peptidiques chargés.

Les peptides ionisés entrent ensuite dans l’analyseur de masse, où ils sont séparés en fonction de leurs rapports masse/charge.

Un ion peptidique sélectionné est dirigé vers la cellule de collision et fragmenté en ions plus petits, dont les rapports masse/charge sont à nouveau mesurés.

Enfin, les données sont comparées à une base de données de référe