Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:02 min • April 28th, 2025
Placez des poinçons de coupe de cerveau de souris saines et neurodégénératives sur des écrans de conservation d’échantillons.
Retournez les écrans et insérez-les dans une plaque de tissu.
Prenez une cartouche de capteur pré-calibrée avec des sondes de sonde. Chargez les composés (pyruvate, oligomycine, FCCP et antimycine A) dans les orifices d’injection.
Placez la cartouche sur la plaque de tissu. Lancez l’exécution dans un analyseur de flux extracellulaire.
Les sondes mesurent le taux de consommation d’oxygène (OCR) de la tranche.
Avec la première injection, le pyruvate pénètre dans les mitochondries, générant des porteurs d’électrons.
Ces transporteurs donnent des électrons aux complexes I et II de la chaîne de transport d’électrons (ETC), initiant une réaction de transfert d’électrons qui augmente la consommation d’oxygène et l’OCR.
L’oligomycine inhibe le complexe V, arrêtant la synthèse de l’ATP et diminuant l’OCR.
FCCP, un protonophore, perturbe le gradient de protons, augmentant la consommation d’oxygène et l’OCR.
L’antimycine A se lie au complexe III et arrête l’ETC, minimisant ainsi l’OCR.
Comparez les profils OCR.
Une diminution de l’OCR dans les tranches neurodégénératives indique
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