Mesure de la réponse auditive du tronc cérébral chez la souris
JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurosciences
0 vues • 2:22 min • April 28th, 2025
Place une souris anesthésiée dans une boîte insonorisée pour enregistrer des seuils d’audition précis.
Insérez une électrode d’aiguille sous la peau au centre de la tête et une autre électrode juste derrière l’oreille.
Place une électrode de masse près de la queue.
Positionne un haut-parleur devant l’oreille de la souris avec l’électrode.
Définit les paramètres souhaités, tels que la fréquence et l’intensité, puis applique des stimuli acoustiques.
L’oreille interne reçoit les stimuli acoustiques et les convertit en signaux électriques qui voyagent via le nerf auditif jusqu’au tronc cérébral.
Les électrodes détectent la réponse auditive du tronc cérébral, ou ABR, qui est enregistrée sous forme d’onde.
Mesurez l’ABR sous une série d’intensités de stimulus souhaitées.
Enregistrez le seuil ABR, qui est l’intensité minimale du stimulus nécessaire pour générer une réponse cérébrale caractérisée par l’apparition de l’onde V.
Utilise un système commercial de test ABR spécialement conçu pour les petits animaux pour les mesures ABR, et maintiens l’animal sous anesthésie générale. Placez des électrodes à aiguille sous-cutanée de 12 millimètres au niveau du vertex, derrière le pavillon de l’oreille gauche et à l’arrière près de la queue pour mesurer le seuil auditif.
Après avoir placé le haut-parleur à un centimètre de l’oreille gauche de l’animal, présentez des stimuli acoustiques à l’aide du haut-parleur. Choisissez l’onde sinusoïdale pour les stimuli et 10K pour l’échelle de fenêtre. Tournez le bouton de fréquence pour obtenir la fréquence souhaitée des stimuli acoustiques.
Ajustez l’intensité du stimulus en tournant le bouton AMLP sur le générateur de fonctions. Obtenez l’intensité de stimulus souhaitée en tournant le bouton AMLP à une tension appropriée calculée à partir de l’étalonnage. Collectez les mesures ABR sous une série d’intensités de stimulus de 10 à 100 décibels SPL avec une taille de pas de 10 décibels. Marquez le niveau d’intensité minimum du stimulus qui pourrait donner naissance à une onde V discernable comme seuil ABR.
Aperçu
Cette étude décrit une méthode de mesure des réponses auditives du tronc cérébral (ABR) chez des souris anesthésiées afin d'évaluer les seuils auditifs. La procédure implique une pose précise des électrodes et l'application d'un stimulus acoustique pour évaluer la réponse cérébrale au son.
Composantes clés de l'étude
Domaine scientifique
- Neurosciences
- Physiologie auditive
- Électrophysiologie
Contexte
- Comprendre le traitement auditif est essentiel pour la recherche en neurosciences.
- Le test des potentiels évoqués auditifs du tronc cérébral (ABR) est une méthode fiable pour évaluer les seuils auditifs chez les petits animaux.
- Les techniques électrophysiologiques permettent d'obtenir des informations sur l'activité du tronc cérébral en réponse au son.
- Une mesure précise de l'ABR peut contribuer à l'étude des troubles auditifs.
Objectif de l'étude
- Établir un protocole pour mesurer les potentiels évoqués auditifs du tronc cérébral (ABR) chez la souris.
- Déterminer l'intensité minimale du stimulus nécessaire pour provoquer une réponse cérébrale.
- Approfondir la compréhension du traitement auditif dans le système nerveux central.
Méthodes utilisées
- Placement des électrodes pour l'enregistrement des PEA.
- Application de stimuli acoustiques à l'aide d'un haut-parleur.
- Mesure des PEA selon différentes intensités de stimulus.
- Utilisation d'un système commercial d'analyse des PEA conçu pour les petits animaux.
Résultats principaux
- Les formes d'onde des PEA ont été enregistrées avec succès chez des souris anesthésiées.
- L'intensité minimale de stimulation pour l'onde V a été déterminée comme étant le seuil des PEA.
- Des mesures ont été effectuées sur une gamme d'intensités allant de 10 à 100 décibels SPL.
- La méthodologie s'est révélée efficace pour l'évaluation des seuils auditifs chez les petits animaux.
Conclusions
- Le protocole établi permet une mesure fiable des PEA chez la souris.
- Cette technique peut être utilisée dans des recherches auditives ultérieures.
- La compréhension des seuils des PEA contribue à la connaissance des mécanismes de traitement auditif.
Questions fréquemment posées
Pertinence professionnelle pour l'industrie
La mesure quantitative de la réponse auditive du tronc cérébral (ABR) chez la souris fournit un indicateur robuste et reproductible pour évaluer l'intégrité des voies auditives et les seuils d'audition dans les modèles précliniques. Cette capacité est essentielle pour la validation de cibles thérapeutiques et la réduction des risques mécanistiques dans la découverte de médicaments contre la surdité et en neuro-otologie. Des seuils ABR fiables permettent une continuité translationnelle depuis la phase initiale de découverte jusqu'à l'évaluation préclinique de la fonction auditive.
Applications stratégiques en R-D biopharmaceutique
Début de la découverte et validation de la cible
- Permet une évaluation objective de la fonction de la voie auditive chez des modèles génétiquement ou pharmacologiquement modifiés.
- Permet une détection mécanistique des risques en reliant les interventions moléculaires aux résultats fonctionnels auditifs.
- Facilite la validation de cibles thérapeutiques dans les programmes sur la surdité et la neuro-otologie en utilisant des critères quantitatifs.
Développement de criblages et de tests
- Fournit des signaux électrophysiologiques normalisés et reproductibles pour le criblage de composés ou de facteurs génétiques.
- Permet le développement de tests avec des seuils quantitatifs clairs pour la réponse auditive.
- Facilite l'évolutivité et la réutilisation de la plateforme dans plusieurs études et modèles.
Recherche translationnelle et préclinique
- Aligne l'évaluation préclinique de la fonction auditive avec les stratégies translatables de biomarqueurs.
- Permet des décisions d'avancement ajustées au risque, fondées sur les résultats fonctionnels de l'audition.
- Assure une continuité allant de la découverte à la validation préclinique dans des systèmes pertinents pour la maladie.
Intégration des pipelines et des flux de travail
La mesure des PEA chez la souris s'intègre dans la continuité découverte-préclinique en tant qu'essai fonctionnel évaluant l'intégrité du système auditif et l'efficacité des interventions.
- Biologie de la découverte : Permet la vérification d'hypothèses concernant l'implication des voies auditives et les effets d'interventions.
- Dépistage : Fournit des seuils ABR reproductibles et quantitatifs pour comparer différentes conditions expérimentales.
- Analyse : Produit des données de forme d'onde et de seuil permettant des comparaisons statistiques de la fonction auditive.
- Recherche translationnelle : Établit un lien entre l'évaluation auditive préclinique et les stratégies de biomarqueurs cliniques, le cas échéant.
- Réutilisation en entreprise : Met en place une plateforme réutilisable pour les tests de fonction auditive dans plusieurs programmes.
Impact opérationnel et organisationnel
- Valeur scientifique : Accroît la confiance prédictive et réduit l'ambiguïté mécanistique dans la recherche auditive.
- Valeur opérationnelle : Normalise l'évaluation de la fonction auditive pour assurer la reproductibilité et la scalabilité.
- Valeur stratégique : Éclaire les décisions de poursuite ou d'abandon et réduit les risques biologiques tardifs dans les portefeuilles sur la perte auditive.
- Impact sur le portefeuille : Permet une priorisation et une avancée ajustées au risque des actifs ciblant l'audition.
Considérations relatives à la mise en œuvre
- Nécessite une expertise en anesthésie des petits animaux et en enregistrement électrophysiologique.
- Suppose l'accès à des systèmes commerciaux de test des PEA et à une présentation calibrée des stimuli acoustiques.
- Exige une standardisation entre équipes en ce qui concerne le positionnement des électrodes et les paramètres des stimuli.
- Une adaptation peut être nécessaire selon les souches de souris ou les phénotypes auditifs.
- Les limites pratiques incluent la manipulation des animaux et la variabilité potentielle du positionnement des électrodes.
F.A.Q. sur la bio-industrie pharmaceutique
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Dernière mise à jour : 29 août 2026