Génération d’un modèle de rat glioblastome

Prenez un rat anesthésié.

Rasez le cuir chevelu. Ensuite, appliquez un gel pour les yeux pour maintenir l’hydratation de la cornée.

Fixez l’animal sur un cadre stéréotaxique et désinfectez le site chirurgical. Faites une incision médiane et rétractez-la pour exposer le crâne.

Perce un trou dans l’hémisphère frontal droit pour accéder au cortex préfrontal.

Positionnez une seringue à guidage stéréotaxique contenant une suspension de cellules de glioblastome, ou de tumeur cérébrale, sur le site foré.

À l’aide d’un contrôleur de pompe, injectez la suspension cellulaire dans le cortex préfrontal.

Retirez lentement l’aiguille pour éviter le reflux des cellules injectées. Ensuite, scellez le site percé avec de la cire d’os.

Suturez l’incision chirurgicale et désinfectez le site.

Retournez le rat dans sa cage et utilisez une lampe rouge pour maintenir la température corporelle.

Après l’injection, les cellules tumorales cérébrales prolifèrent, s’infiltrent dans les tissus environnants et induisent l’angiogenèse, perturbant le fonctionnement normal du cerveau et générant un modèle de glioblastome.

Pour inoculer le cerveau d’un rat Fisher F344 anesthésié de 170 grammes, femelle, avec des cellules de gliome, d’abord, confirmez la sédation par l’absence de réponse au pincement de l’orteil. Retirez les poils du niveau des yeux à l’arrière du crâne et appliquez une pommade sur les yeux de l’animal. Immobiliser l’animal à l’aide d’un dispositif stéréotaxique. Désinfectez la peau exposée avec de la povidone iodée et exposez le crâne avec une incision de 2 centimètres au milieu du cuir chevelu. À l’aide d’une perceuse diamantée, faites un trou de 1 millimètre, un trou de 2 millimètres à l’arrière et un trou de 2 millimètres et demi sur le côté du bregma dans l’hémisphère frontal droit.

Ensuite, chargez l’aiguille d’une seringue à insuline de calibre 29 avec 5 microlitres de suspension cellulaire. Et utilisez un contrôleur de pompe à micro-seringue pour injecter les cellules à trois millimètres de profondeur dans le crâne sous guidage stéréotaxique, et retirez l’aiguille lentement. Fermez l’incision avec de la cire pour os. Ensuite, suturez et désinfectez la peau avec plus de povidone iodée. Et utilisez une lampe rouge pour stabiliser la température corporelle de l’animal, après l’opération, avec surveillance jusqu’à la guérison complète.