Évaluation de l’intégrité de la barrière hémato-encéphalique dans un modèle de rat de lésion cérébrale induite par laser

Prenons un modèle de rat témoin anesthésié et de rat de lésion cérébrale induite par laser.

L’application laser sur l’hémisphère droit a endommagé les cellules et la barrière hémato-encéphalique, ou BBB, qui sépare le sang du tissu cérébral.

Injecte un colorant de suivi dans la veine de la queue canulée qui se déplace dans la circulation systémique pour atteindre le cerveau.

Le colorant se lie aux protéines plasmatiques et s’infiltre dans le tissu cérébral par la BHE endommagée.

Euthanasier les rats.

Perfuser les rats à travers le cœur pour éliminer le colorant de la circulation.

Extraient et découpent le cerveau, isolez les tranches de l’hémisphère blessé et homogénéisez-les.

Traitez avec une solution acide pour dénaturer les protéines, libérant ainsi le colorant lié aux protéines.

Centrifuge et isole le surnageant contenant du colorant. Ajoutez de l’alcool pour améliorer la fluorescence du colorant.

Transfère la solution dans une microplaque. Lors de l’excitation, une intensité de fluorescence plus élevée dans le cerveau blessé indique des dommages à la BHE induits par le laser.

Pour évaluer l’incidence de la rupture de la barrière hémato-encéphalique, 24 heures après la lésion induite p