Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:47 min • April 28th, 2025
Commence avec un embryon de drosophile disséqué fixé sur une lame de verre entourée de ruban adhésif.
Les motoneurones de la mouche sont marqués par fluorescence pour la visualisation.
À l’aide d’un microscope, visualisez l’embryon et positionnez une micropipette remplie de colorant lipophile fluorescent vert près de l’embryon.
Ensuite, passez en mode fluorescence et localisez l’extrémité axonale du motoneurone à la jonction neuromusculaire, là où le motoneurone se connecte au muscle.
Passez en mode fond clair, contactez l’extrémité de l’axone cible avec la pipette, libérez une goutte de colorant, puis incuberez.
En raison de leur nature lipophile et de leur voisinage axonal, les colorants pénètrent sélectivement dans la membrane riche en lipides de l’axone ciblé.
Au fil du temps, le colorant se déplace rétrogradement, se déplaçant vers l’arrière le long de la bicouche lipidique axonale vers le corps neuronal, étiquetant les projections neuronales.
Retirez le ruban de la lame et placez une lamelle.
Observez la lame sous un microscope confocal.
Le neurone cible marqué rétrograde apparaît en fluorescence verte, affichant une morphologie neuronale et des projections détaillées.
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