Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:36 min • May 29th, 2025
Prenons l’exemple d’une souris transgénique anesthésiée exprimant des protéines fluorescentes dans des neurones pyramidaux clairsemés.
La souris est implantée avec une canule d’imagerie sur l’hippocampe dorsal.
Placez la souris sous le microscope à deux photons sur un coussin chauffant, en fixant la plaque de tête de la canule au support pour immobiliser sa tête.
Appliquez une pommade pour prévenir le dessèchement de la cornée.
Nettoyez la canule avec de l’eau déminéralisée et inspectez-la sous un objectif à faible grossissement pour vérifier s’il n’y a pas de débris, de dommages ou de problèmes de fluorescence.
Alignez la canule d’imagerie avec l’axe optique du microscope pour une imagerie précise.
Ensuite, passez à un objectif haute résolution à immersion dans l’eau.
Remplissez la canule avec de l’eau déminéralisée, en veillant à ce qu’il n’y ait pas de bulles d’air pour éviter la distorsion de l’image.
Effectuez une imagerie longitudinale à deux photons à l’aide de la lumière infrarouge pour exciter sélectivement les fluorophores dans le plan focal, permettant ainsi l’imagerie des tissus profonds.
La canule implantée facilite l’accès répété à l’hippocampe dorsal pour suivre les changem
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