Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:11 min • May 29th, 2025
Prenez un rat anesthésié avec le crâne exposé et recouvert d’un rideau.
Percez un trou pour exposer la dure-mère, la couche la plus externe du cerveau, innervée par des neurones sensoriels sensibles à la douleur provenant du ganglion du trijumeau et des ganglions de la racine dorsale cervicale.
Construisez une barrière pour éviter les fuites, introduisez un traceur rétrograde et scellez le trou.
Suturez la plaie et laissez le rat se rétablir.
Le traceur pénètre dans les axones neuronaux sensoriels, se déplace rétrogradement vers leurs ganglions et pénètre dans les corps cellulaires neuronaux.
Euthanasiez le rat et disséquez les ganglions.
Préparez des sections des ganglions et montez-les sur des diapositives.
Ajouter une solution pour perméabiliser les membranes cellulaires et masquer les sites de liaison non spécifiques.
Incuber avec des anticorps primaires ciblant les neuropeptides spécifiques du traceur et des neurones sensoriels.
Ajouter des anticorps secondaires marqués par fluorescence spécifiques aux anticorps primaires.
À l’aide de la microscopie à fluorescence, observez la colocalisation des neuropeptides et des traceurs au sein des corps cellulaires, confirmant ainsi l’origine gan
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