Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:14 min • May 29th, 2025
Prenez une chambre d’imagerie contenant du tissu du plexus myentérique colique de souris immobilisé, qui abrite des plexus ganglionnaires composés de réseaux de neurones entériques et de cellules gliales.
Ces cellules sont marquées avec un indicateur de calcium qui devient fluorescent lors de la liaison du calcium.
Ensuite, placez la chambre sur une platine de microscope à fluorescence. Perfuser la chambre avec un tampon préchauffé contenant des inhibiteurs pour supprimer les contractions musculaires pendant l’imagerie.
À l’aide d’un microscope, identifiez les régions ganglionnaires saines qui présentent une fluorescence uniforme.
Acquérir des images fluorescentes pour mesurer l’activité de base, fournissant une référence pour les niveaux de calcium intracellulaire.
Perfuser le tissu avec un agoniste du récepteur pour activer les récepteurs neuronaux, ce qui déclenche un afflux de calcium intracellulaire et une augmentation de l’intensité de la fluorescence.
L’activation neuronale stimule indirectement les cellules gliales environnantes, entraînant un afflux de calcium et une augmentation ultérieure de la fluorescence.
Capturez des images fluorescentes en accéléré pour mesurer les changem
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