Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:19 min • May 29th, 2025
Placez une tranche de cerveau de souris fixée chimiquement dans un plat à fond de verre contenant un tampon et fixez-la avec un filet.
Connectez une électrode remplie d’un colorant fluorescent anionique hydrophile à une source de tension.
Insérez une électrode de terre dans le tampon pour terminer le circuit électrique.
À l’aide d’un éclairage en fond clair, avancez l’électrode remplie de colorant vers la tranche.
Passez à l’imagerie infrarouge différentielle par contraste interférentiel pour localiser un astrocyte.
Percez le soma astrocytaire avec l’électrode pour accéder au cytoplasme.
Appliquez un courant électrique pour faire pénétrer le colorant dans le cytoplasme par ionophorèse.
Passez à la microscopie confocale pour surveiller le mouvement du colorant.
Le colorant hydrophile, incapable de traverser la membrane hydrophobe, se diffuse dans le cytoplasme pour remplir le soma et les branches.
Une fois la cellule remplie, arrêtez le courant et retirez l’électrode.
Laissez la membrane astrocytaire se refermer.
Acquérez des images à différents plans Z et reconstruisez-les pour visualiser la morphologie des astrocytes.
Pour le test d’injection de colorant, placez délicatement une tranche de
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