Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:08 min • May 29th, 2025
Commencez avec un couvercle de boîte de Pétri contenant le cerveau larvaire de la drosophile, pré-exposé à un cycle lumière/obscurité. La tranche contient des neurones de l’horloge exprimant des protéines fluorescentes.
Ajoutez un milieu riche en nutriments avec des antibiotiques pour favoriser la survie neuronale et une solution chaude de fibrinogène.
Mélangez doucement la solution pour répartir uniformément le fibrinogène.
Placez une petite quantité de ce mélange sur la lamelle d’une parabole à fond de verre. Ajoutez de
la thrombine pour réagir avec le fibrinogène afin d’induire la formation d’une matrice de fibrine tridimensionnelle.
Transférez le cerveau sur cette matrice, en le positionnant sur le côté antérieur pour aligner les neurones de l’horloge pour l’imagerie.
Pliez la matrice sur le cerveau pour l’ancrer et empêcher tout mouvement.
Ajoutez un milieu riche en nutriments pour inactiver l’activité de la thrombine.
Scellez la boîte avec une membrane perméable aux gaz pour maintenir l’hydratation et la viabilité neuronale.
Effectuez une imagerie de fluorescence en accéléré à des intervalles spécifiques.
Les changements de fluorescence dans les neurones de l’horloge révèlent
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