Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:34 min • May 29th, 2025
Commencez par des sections tangentielles préfixées des sections corticales cérébrales aplaties. Laver pour éliminer les traces fixatrices.
Teindre les sections avec une solution de diaminobenzidine ou DAB et de sulfate de nickel-ammonium.
Le DAB se diffuse dans les neurones corticaux et réagit avec la cytochrome oxydase dans les mitochondries, formant un précipité sombre. Le sulfate de nickel-ammonium assombrit le précipité, améliorant le contraste.
Ajoutez du paraformaldéhyde pour arrêter la réaction de coloration, puis rincez.
Montez les sections sur une lame et déshydratez-les avec des lavages à l’éthanol.
Rincez avec de l’isopropanol et du xylène pour dégager la section et améliorer la transmission de la lumière.
Appliquez un support de montage et placez-y une lamelle. Lorsqu’ils
sont imagés au microscope à fond clair, à l’intérieur des neurones corticaux, les précipités absorbent et diffusent la lumière, ce qui les fait paraître sombres.
En revanche, les zones non tachées et dégagées transmettent la lumière et apparaissent brillantes.
Ce contraste met en évidence les modules corticaux comme des structures sombres et inégales sur un fond plus clair, représentant des groupes neurona
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques