Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:59 min • May 29th, 2025
Prenez un insert membranaire contenant des tranches de cerveau organotypiques embryonnaires de souris transduits, où les neurones et les cellules gliales radiales expriment des protéines fluorescentes, permettant leur visualisation.
À l’aide de la microscopie à fluorescence, sélectionnez une tranche avec des neurones corticaux fluorescents migrant radialement vers la surface piale de la tranche à l’aide d’échafaudages gliaux radiaux intacts.
Transférez l’insert à membrane avec la tranche sélectionnée dans une parabole à fond de verre avec un support pour soutenir l’activité cellulaire pendant l’imagerie.
Placez la boîte dans la chambre climatisée du microscope confocal inversé pour assurer la viabilité cellulaire.
Ajustez les paramètres d’imagerie pour capturer des images claires tout en minimisant les dommages photo.
Ensuite, configurez une pile Z dans la région ciblée pour visualiser les structures cellulaires.
Lancez l’imagerie en accéléré à intervalles réguliers.
Analysez les images pour évaluer la migration radiale des neurones corticaux de la zone sous-ventriculaire vers la plaque corticale le long des échafaudages gliaux radiaux, en mettant en évidence les modèles de migration neur
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