Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:16 min • May 29th, 2025
Prenez une culture de cellules précurseurs d’oligodendrocytes (OPC), isolées du cerveau d’un petit rat, qui ont été induites à se différencier en oligodendrocytes. Les cellules sont fixées pour préserver l’architecture cellulaire.
Les oligodendrocytes différenciés expriment la protéine basique de la myéline, ou MBP, un marqueur des oligodendrocytes matures, tandis que les OPC et les cellules différenciées expriment le facteur de transcription des oligodendrocytes 2, ou Olig2.
Appliquez une solution bloquant la perméabilisation et incubez avec agitation, perméabilisant les membranes cellulaires et bloquant les sites de liaison non spécifiques.
Ajouter des anticorps primaires ciblant les marqueurs et incuber en agitant pour permettre la liaison.
Laver pour éliminer les anticorps non liés, puis ajouter différents anticorps secondaires conjugués aux fluorophores spécifiques aux anticorps primaires et incuber avec agitation.
Lavez les cellules, puis placez-les dans un système d’imagerie à double fluorescence.
Utilisez la lumière de longueurs d’onde spécifiques pour exciter les fluorophores distincts et détecter les signaux émis pour visualiser les marqueurs.
Identifier les oligodendrocytes di
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