Visualisation des mitochondries dans les fibres nerveuses intraépidermiques
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:37 min • May 29th, 2025
Commencez par une coupe de tissu cutané épidermique contenant des fibres nerveuses intraépidermiques ou IENF, de fines terminaisons neuronales sensorielles.
Les IENF sont riches en mitochondries, fournissant de l’énergie pour la transmission du signal neuronal.
Le tissu a des IENF, des mitochondries et des noyaux épidermiques marqués par fluorescence.
À l’aide d’un microscope confocal inversé, acquérez séquentiellement des signaux fluorescents discrets à des longueurs d’onde appropriées pour les noyaux, les IENF et les mitochondries.
Activez un balayage en direct pour capturer le signal IENF, englobant la couche épidermique.
Ensuite, effectuez un balayage séquentiel de chaque signal afin d’éliminer la diaphonie du signal de fluorescence.
À partir de l’image combinée, à l’aide du logiciel, recadrez et isolez les cellules épidermiques fluorescentes bleues.
Ensuite, traitez la zone recadrée pour améliorer la résolution des signaux IENF verts et des signaux mitochondriaux rouges.
Ensuite, générez une image de surface 3D pour créer un masque pour les IENF, puis superposez-la sur l’image de surface mitochondriale pour isoler les mitochondries spécifiques aux nerfs.
Dans la sortie finale, les I
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