Imagerie des mitochondries neuronales à l’aide d’un microscope électronique à balayage à face carrée en série
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:25 min • May 29th, 2025
Prenez une section de tissu cérébral de souris coupée et incrustée de résine contenant l’hippocampe.
La section est colorée avec des métaux lourds pour améliorer le contraste au microscope électronique.
Montez la section sur une broche en aluminium à l’aide de colle cyanoacrylate.
Enduire les côtés du bloc de pâte d’argent colloïdal pour créer un chemin conducteur vers la broche en aluminium.
Examinez le bloc de tissu à l’aide d’un microscope électronique à balayage à face de bloc en série (SBFSEM).
À l’intérieur du SBFSEM, l’ultramicrotome découpe séquentiellement le bloc en couches ultraminces tandis qu’un faisceau d’électrons à basse tension balaie la surface exposée.
Un détecteur d’électrons rétrodiffusés capture des images 2D haute résolution, révélant les mitochondries et les structures cellulaires environnantes.
À l’aide d’un logiciel approprié, ajustez la luminosité et le contraste pour améliorer la clarté de l’image.
Alignez les images séquentielles pour reconstruire un volume 3D du tissu cérébral. Cette reconstruction 3D permet une cartographie précise de la morphologie mitochondriale, de la distribution spatiale et de leurs relations au sein des compartiments neuronaux.
Coup
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