Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:33 min • May 29th, 2025
Commencez par un ensemble de perfusion placé sur la platine d’un microscope inversé.
L’ensemble de perfusion contient un nerf périphérique disséqué fixé entre une lamelle de recouvrement et une lame de micro-aqueduc avec une perfusion saline continue.
Les axones myélinisés du nerf expriment les neurofilaments verts marqués au fluorophore.
À l’aide d’un éclairage en fond clair, concentrez-vous sur les axones myélinisés.
Passez en mode confocal, photoblanchissez avec une puissance laser élevée, puis capturez une image de référence à faible autofluorescence à l’aide d’une faible puissance laser.
Tracez des lignes parallèles le long de l’axone pour définir la longueur de la fenêtre de photoactivation. Utilisez-le comme guide pour créer une zone d’activation rectangulaire.
Illuminez cette région avec une longueur d’onde spécifique pour activer les neurofilaments marqués au fluorophore vert, ce qui les rend fluorescents. Acquérez l’image.
Après l’activation, capturez des images en accéléré.
Au fil du temps, les neurofilaments fluorescents se déplacent dans les deux sens et se propagent dans les régions latérales adjacentes.
L’apparition de fluorescence dans les régions flanquantes adjacentes à la
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques