Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:54 min • May 29th, 2025
Fixez une drosophile transgénique immobilisée avec la tête exposée dans une chambre d’enregistrement sur une platine de microscope à fluorescence.
Le corps champignon de la mouche comprend des neurones exprimant la protéine de fusion bioluminescente sensible au calcium, qui est activée par un cofacteur préchargé.
Connectez un tube de perfusion à la chambre. Localisez les corps de champignons fluorescents, en vous concentrant sur le calice et les lobes médiaux. Confirmez le drainage à l’aide d’un tampon. Définissez
les paramètres d’imagerie et concentrez-vous sur le calice et les lobes médiaux. Dans l’obscurité, acquérez des images de fluorescence de référence des corps des champignons avant l’exposition aux stimulants.
Perfuser la nicotine dans un tampon contenant du calcium pour activer les récepteurs nicotiniques de l’acétylcholine, déclenchant l’afflux de calcium et l’émission de lumière bioluminescente.
Laver avec un tampon pour rétablir les conditions de base.
Perfuser du chlorure de potassium pour dépolariser les neurones, déclenchant la libération de calcium intracellulaire et l’émission de signaux bioluminescents.
Laver avec un tampon pour rétablir les conditions de base.
Analy
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