Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:57 min • June 17th, 2025
Positionnez un rat anesthésié sur la station d’imagerie avec un masque nasal pour maintenir l’anesthésie.
Retirez la fourrure autour des oreilles et du cou pour éviter d’interférer avec l’imagerie par échographie.
Disposez l’animal de manière à étendre ses membres. Appliquez de la crème pour électrodes sur les capteurs et fixez les pattes pour surveiller les paramètres vitaux.
Appliquez du gel à ultrasons sur la tête du rat et le transducteur pour une transmission efficace des ultrasons.
Ensuite, inclinez le plan de travail pour exposer le côté temporal de la tête.
Alignez le transducteur verticalement pour imager les structures cérébrales plus profondes.
Définissez les paramètres d’acquisition de l’échographie en mode B. Pendant l’imagerie, le transducteur émet des ondes ultrasonores qui se réfléchissent sur les interfaces tissulaires, générant une carte en niveaux de gris de l’anatomie du cerveau.
Ajustez le transducteur pour qu’il s’aligne avec la région cérébrale cible.
Passez en mode Doppler couleur pour visualiser les vaisseaux sanguins du cerveau.
Ajustez les paramètres pour permettre la détection en temps réel de la vitesse et de la direction du flux sanguin.
Posez le rat sur le plan de travail d’une station d’échographie et d’imagerie photoacoustique, et positionnez rapidement le nez à l’intérieur du masque approprié, fournissant un flux d’anesthésie constant. Pour raser l’animal, étalez une couche consistante de crème dépilatoire sur la surface de la tête, en couvrant les zones entourant les oreilles et le cou. Après avoir laissé agir la crème pendant plusieurs minutes, retirez-la délicatement à l’aide d’une spatule. Enlevez délicatement tous les restes de crème à l’aide d’une éponge humide pour nettoyer la peau avec précision.
Pour positionner le rat, disposez l’animal en position d’aigle écarté. Appuyez-vous sur les capteurs de paramètres vitaux sur le plan de travail après avoir appliqué quelques gouttes de crème d’électrode pour surveiller les signes vitaux. Enfin, fixez les membres avec un patch en soie artificielle hypoallergénique.
Disposez ensuite une couche consistante de gel de transmission d’ultrasons hypoallergénique et soluble dans l’eau sur la tête de l’animal. Couvrez la tête du transducteur avec une fine couche du même gel et mettez-la en contact avec la couche sur le rat. Soulevez la tête de l’animal et tournez-la légèrement d’un côté.
Utilisez un rouleau de coton comme support, en gardant le museau bien inséré dans le masque d’anesthésie. Inclinez le plan de travail à un angle d’environ 30 degrés par rapport au plan horizontal. Tournez le capteur d’image à un angle d’environ 30 degrés par rapport au plan vertical.
Pour l’acquisition d’images anatomiques et vasculaires par ultrasons et photoacoustiques, activez le balayage d’imagerie. Entrez dans l’acquisition d’image en mode B et réglez correctement tous les paramètres d’acquisition d’image pour respecter les exigences éventuelles de l’expérience. Réglez la fréquence du centre d’émission aussi bas que possible afin d’avoir la profondeur de pénétration maximale pour le transducteur.
Démarrez l’acquisition d’images en mode B et ajustez le positionnement de la sonde en temps réel en identifiant les références anatomiques et en centrant la région d’intérêt sur le point médian du moniteur. Placez le transducteur de manière à l’aligner sur l’axe virtuel, en connectant l’oreille à l’œil pour obtenir une focalisation optimale du faisceau. Acquérez différentes vues du volume interne du cerveau par rotation dans le sens des aiguilles d’une montre ou dans le sens inverse des aiguilles d’une montre. S’assurer que la région cérébrale d’intérêt se localise à 10 millimètres de profondeur par rapport à la source du transducteur laser à ultrasons afin de recevoir un signal de réponse photoacoustique optimal.
Ensuite, entrez en mode Doppler couleur pour visualiser les vaisseaux sanguins internes du cerveau de manière très sensible. Ensuite, choisissez le paramètre d’acquisition souhaité défini en mode Doppler couleur. Acquérez des images dans cette modalité pour distinguer les vitesses et les directions du flux sanguin jusqu’à plusieurs millimètres de profondeur de pénétration.