Imagerie multispectrale à réflectance diffuse du flux sanguin cérébral et de la structure tissulaire du rat

Commencer avec un rat anesthésié préparé avec une fenêtre crânienne exposant les vaisseaux sanguins et les tissus corticaux.

Placez le rat sur une platine d’imagerie, en vous assurant qu’il reste connecté à un embout buccal administrant l’anesthésie et à un mélange gazeux pour réguler les niveaux d’oxygène.

Focalisez la caméra sur la surface du cerveau. Faites passer la lumière à large bande à travers un filtre pour isoler des longueurs d’onde spécifiques.

Un guide de lumière et une lentille collectrice dirigent la lumière filtrée sur le tissu cortical.

À l’intérieur du tissu, la lumière est absorbée par l’hémoglobine, en fonction de son état d’oxygénation, et diffusée par les cellules, produisant une réflectance diffuse.

Capturez cette lumière diffusée à l’aide de l’appareil photo, en optimisant la luminosité en ajustant le temps d’intégration.

Répétez l’imagerie sur plusieurs longueurs d’onde avec une roue à filtres rotative pour collecter des données spectrales.

Enfin, bloquez le chemin de la lumière pour capturer une image sombre, puis soustrayez-le des images spectrales pour supprimer le bruit.

Ces images traitées révèlent le flux sanguin cérébral, l’oxygénation et la structure des tissus.

Commencez par placer doucement le rat sur la scène et ajustez lentement le niveau de la scène afin que la caméra puisse se concentrer sur la surface du cerveau du rat. Dans le logiciel d’acquisition d’images, sélectionnez la commande Enregistrer dans le menu Fichier pour enregistrer une image dans un fichier, en la nommant en fonction de l’échantillon et de la longueur d’onde.

Changez ensuite l’emplacement du filtre en tournant la roue porteuse. Répétez l’acquisition de l’image à chacune des neuf longueurs d’onde. Ensuite, éteignez la source lumineuse de la lampe halogène. Bloquez le chemin de la lumière vers le système de caméra à dispositif monochromatique à couplage de charge à l’aide d’une plaque de blindage. Enfin, sélectionnez la commande Enregistrer dans le menu Fichier, puis choisissez un nom de fichier qui identifie l’échantillon.