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Commencez avec un rat atténué et éveillé dans un gabarit expérimental, avec sa tête fermement fixée en place.
Ouvrez la chambre d’enregistrement précédemment implantée et retirez le revêtement en gel de silicone.
Éliminez tout tissu repoussé pour accéder au cerveau.
Ajoutez une goutte de solution saline pour maintenir l’hydratation.
Ensuite, fixez une pipette d’enregistrement préremplie contenant du colorant bleu de Chicago à un micromanipulateur.
Abaissez la pipette dans la chambre d’enregistrement jusqu’à ce qu’elle atteigne la région cérébrale cible.
La pipette entre en contact avec le neurone et enregistre les signaux du neurone sans le pénétrer.
Écoutez ces signaux neuronaux sous forme de clics audibles, puis délivrez des impulsions électriques à travers la pipette.
Ces impulsions injectent le colorant adjacent au neurone, permettant une coloration précise de la région cérébrale cible.
Ces techniques d’enregistrement et de coloration juxtacellulaires permettent de visualiser avec précision le site d’enregistrement et de cartographier avec précision l’activité neuronale en fonction de l’anatomie du cerveau.
Placez le rat dans la chaussette en tissu et transférez la chaussette en tissu dans un tube rigide sur un gabarit expérimental approprié. Fixez la plaque de retenue de la tête sur le rat à la pièce correspondante sur le gabarit. Ensuite, placez un écrou 832 sur le boulon de retenue de la tête qui est implanté sur le rat.
Ensuite, vissez une tige filetée en acier inoxydable au boulon de tête. Après cela, ouvrez la chambre d’enregistrement et retirez le gel de silicone. Nettoyez la craniotomie à l’aide d’une pince fine si du tissu a repoussé dans la craniotomie. Utilisez une anesthésie à l’isoflurane pendant ce processus, si nécessaire.
Ensuite, fixez la pipette au micromanipulateur motorisé. Déplacez la pipette à l’emplacement d’enregistrement souhaité dans les axes latéraux antérieur, postérieur et médial. Ensuite, avancez la pipette ventralement à travers la dure-mère jusqu’à ce qu’elle soit à environ 500 micromètres dorsale de l’emplacement d’enregistrement prévu. Avancez lentement la pipette tout en écoutant les événements de pic sur un moniteur audio de la tension amplifiée enregistrée. Une fois les événements de dopage identifiés, continuez à déplacer la pipette d’environ 0 à 100 micromètres jusqu’à ce que les déviations de tension positives soient supérieures à environ 500 microvolts.
Pour étiqueter le site d’enregistrement, réglez la source de courant sur moins 4 microampères avec deux impulsions de seconde à 50 % du rapport cyclique. Et faites passer le courant pendant quatre minutes pour injecter l’iontophorétique Chicago Sky Blue à travers la pipette.