Technique d’aspiration et de traitement percutané des spermatozoïdes de l’épididyme

Commençons par un patient masculin atteint d’azoospermie, une condition dans laquelle le sperme manque de gamètes mâles ou de spermatozoïdes.

La région génitale est désinfectée et recouverte d’un drap pour n’exposer que le scrotum, l’organe qui abrite les testicules, qui produisent les spermatozoïdes.

Éclairer la région et identifier l’épididyme, une structure responsable de la maturation et du stockage des spermatozoïdes.

Insérez une seringue contenant une solution de culture spécialisée pour les gamètes dans le tissu épididymaire.

Appliquez une pression négative tout en perforant le tissu pour extraire le liquide épididymaire contenant les spermatozoïdes.

Transférez le liquide recueilli dans une boîte contenant la solution de culture pour préserver la viabilité des spermatozoïdes.

À l’aide d’un microscope, comptez les spermatozoïdes matures et sains qui présentent une motilité.

Transférez la solution dans un tube, puis centrifugez-la pour séparer les spermatozoïdes et éliminer le surnageant.

Remettez les cellules en suspension dans une solution de culture fraîche.

Les spermatozoïdes isolés sont maintenant prêts à être utilisés dans les procédures de traitement de l’infertilité.

Pour commencer, rassemblez un paquet d’instruments chirurgicaux, deux seringues, une solution désinfectante, des gants en caoutchouc stériles et un pansement adhésif. Examinez l’emballage des instruments chirurgicaux qui a subi une stérilisation à la vapeur à haute pression pour détecter tout dommage. Placez l’emballage sur la table à instruments et ouvrez la couche extérieure. Ensuite, demandez aux andrologues de mettre des gants en caoutchouc stériles.

Ouvrez la couche intérieure de l’emballage des instruments chirurgicaux et vérifiez que le ruban indicateur de stérilisation est correct. Ensuite, préparez deux seringues de 5 millilitres équipées d’aiguilles de 0,7 millilitres pour l’anesthésie et la chirurgie. Ouvrez l’ampoule contenant l’injection de lidocaïne. Utilisez une seringue stérile de 5 millilitres pour aspirer la solution de lidocaïne et éliminer les bulles d’air de la seringue.

Maintenant, positionnez le patient préparé sur la table d’opération en position de lithotomie. Après avoir retiré le pantalon, fixez le vêtement supérieur au-dessus du nombril pour exposer complètement le périnée et le bas-ventre sous le nombril. Ensuite, ajustez l’angle de la lampe sans ombre pour éclairer le scrotum du patient.

Utilisez une pince ovale pour saisir une boule de gaze stérile. Immergez complètement la boule de gaze dans une solution désinfectante. Et désinfectez la peau, en commençant par le bas-ventre et en allant vers l’avant et l’intérieur des cuisses, la zone périnéale, le pénis et le scrotum. Ensuite, placez une serviette carrée stérile sous les fesses du patient. Étalez une serviette stérile autour de la zone chirurgicale, en exposant complètement le scrotum dans toute la zone.

À l’aide d’une pipette Pasteur stérile, transférez environ 2 millilitres de solution de culture G-MPOS-PLUS dans la boîte de culture. Après avoir fermé le couvercle, remettez la boîte à l’infirmière dans la salle d’opération par la fenêtre de transfert. Maintenant, placez le bol de culture sur la serviette stérile de la table à instruments et ouvrez le couvercle.

À l’aide d’une autre seringue de 5 millilitres, aspirez environ 0,2 millilitre de solution de culture G-MPOS-PLUS et éliminez les bulles d’air. Ensuite, tenez le scrotum du patient avec la main gauche, en fixant l’épididyme qui nécessite une ponction. Palper l’épididyme avec la main droite pour confirmer l’emplacement de la ponction chirurgicale.

Ensuite, à l’aide d’une seringue de 5 millilitres contenant la solution de culture G-MPOS-PLUS dans la main droite, percez perpendiculairement à la peau dans le tissu épididymaire. Tout en maintenant une pression négative, perforez de manière répétitive le tissu épididymaire pour permettre au liquide de pénétrer par l’aiguille, puis retirez l’aiguille de ponction.

Injectez le liquide épididymaire extrait dans la boîte de culture. Après cela, aspirez la solution de culture G-MPOS-PLUS à proximité pour rincer la seringue afin de maximiser la quantité de liquide épididymaire recueillie. Maintenant, transférez la boîte de culture contenant le liquide de culture G-MPOS-PLUS et le liquide épididymaire au technicien de laboratoire d’embryons par la fenêtre de transfert.

Placez la boîte de culture sur la platine d’un microscope optique inversé et fixez-la. Allumez l’interrupteur d’alimentation du microscope et réglez l’intensité lumineuse en conséquence. Ensuite, faites pivoter le convertisseur du microscope optique inversé. Sélectionnez l’objectif 10 fois l’objectif et tournez les spirales de mise au point grossière et fine pour ajuster la distance focale.

Une fois que les spermatozoïdes de l’épididyme sont localisés, observez-les à un grossissement de 40 fois pour évaluer leur nombre et leur qualité. À l’aide d’une pipette Pasteur stérile, transférez le liquide de la boîte de culture dans un tube à centrifuger de 15 millilitres après avoir observé suffisamment de spermatozoïdes actifs. Placez le tube à centrifuger sur le plateau d’équilibrage et utilisez un tube à centrifuger de la même spécification contenant de l’eau stérile pour niveler.

Ouvrez ensuite la porte de la centrifugeuse. Placez les tubes dans la fente pour carte de manière symétrique et fermez la porte. Appuyez sur le bouton Start pour lancer le processus de centrifugation. Une fois le processus terminé, retirez le tube contenant le liquide épididymaire de la centrifugeuse. Ensuite, aspirez doucement le surnageant à l’aide d’une pipette Pasteur stérile et jetez le surnageant tiré.

À l’aide d’une pipette Pasteur stérile, transférez le sédiment du fond du tube à centrifuger dans un nouveau tube à centrifuger contenant environ 2 millilitres de solution de culture G-IVF Plus. Pipetez doucement la solution pour bien remettre le sédiment en suspension. Transférez environ 0,5 millilitre de solution de culture G-IVF Plus dans le tube à centrifuger. Soufflez doucement les spermatozoïdes de l’épididyme au fond pour les rendre complètement suspendus et utilisez-les pour la procédure ICSI.